唐建烽

摘要 PCR技术是现代生物学研究中常涉及的重要技术，也是高中生物教学的重点和难点。由于高中实验室条件限制，学生缺少实操演习，学习难度大，考试得分率低。通过对考试题目中常见的PCR应用类型进行总结和梳理，希望帮助学生突破学习难点，起到举一反三的作用。

关键词 PCR 应用 基因工程 高中生物

中图分类号 G633.91

文献标志码 B

PCR是一种以特定靶DNA片段为模板，以目的基因特异性碱基序列设计的引物为起点，在耐高温DNA聚合酶催化下，通过反复的高温变性、低温退火、中温延伸等步骤，快速、特异性地体外复制出目的DNA片段的技术。自PCR发明以来，科研人员在此基础上进行了大量改进，开发了适用于不同生物学研究目的的PCR技术，如反向PCR、不对称PCR、实时PCR、数字PCR技术。由于PCR具有敏感、特异、快速、简便等优点，被广泛应用于食品安全检测、疾病检验、遗传病诊断、基因进化研究等领域，对分子生物学的发展产生了深刻影响。在以“真科学考查真素养”为背景下的高考试题中，试题内容多选用前沿科技成果作为素材进行命制，以真实的科研研究创建真实的科学探究情景和研究任务。PCR作为现代分子生物学常用的技术，高考试题经常涉及对PCR技术应用的考查，且考查方法多种多样。

1基因工程操作程序中的应用

这类知识考查的原型是《选择性必修3·生物技术与工程》中有关基因工程基本操作程序的相关知识。PCR技术可用于获取和扩增目的基因、增添酶切位点、检测目的基因是否正向连接等。……