钗丽干　张帆

[摘要] 目的 探讨GATA3在前列腺癌（PCa）组织中的表达并分析其与临床病理特征的关系。 方法 选取2013年3月～2015年12月内蒙古自治区人民医院病理科存档的92例PCa穿刺活检患者标本为PCa组及患者年龄相匹配的60例良性前列腺增生（BPH）蜡块为BPH组，采用免疫组化法检测两组中GATA3的表达情况。 结果 PCa组中GATA3的阳性表达率为83.70%，BPH组中GATA3阳性表达率为10.00%，差异有统计学意义（P < 0.05）。PCa组中GATA3蛋白表达的阳性率随着Gleason评分增高、TNM分期越晚及血清PSA浓度增大而升高，差异有统计学意义（P < 0.05），而GATA3蛋白的表达阳性率在不同年龄组、淋巴结是否发生转移间差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 GATA3在PCa中高表达，提示其参与PCa的发展进程。

[关键词] 前列腺癌；良性前列腺增生；GATA3；免疫组化

[中图分类号] R737.25 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）01（c）-0023-04

[Abstract] Objective To investigate the expression of GATA3 in prostate cancer （PCa） and its correlation with clinico-pathologic parameters. Methods 92 cases of PCa biopsy specimens in Department of Pathology， Inner Mongolia People′s Hospital from March 2013 to December 2015 were selected as PCa group， 60 wax blocks of BPH with age matched were selected as BPH group. Immunohistochemical method was used to detect the expression of GATA3 in two groups. Results The positive expression rate of GATA3 in PCa group was 83.70%， positive expression rate of GATA3 in BPH group was 10.00%， with statistical difference （P < 0.05）. The positive expression rate of GATA3 in PCa patients was positively related to the development of Gleason score， TNM stages and serum PSA concentration （P < 0.05）， but not to the age and with or without lymphatic metastasis （P > 0.05）. Conclusion The over-expression of GATA3 may play an important role in the pathogenesis of PCa.

[Key words] Prostate cancer； Benign prostatic hyperplasia； GATA3； Immunohistochemistry

前列腺癌（prostate cancer，PCa）是男性泌尿生殖系統最常见的恶性肿瘤，约占男性全部癌症种类的14%[1]。PCa的发病率及死亡率有显著的地域性差异，欧美等发达国家的发病率及死亡率均高于发展中国家[2]。随着我国社会经济的快速发展以及整体医疗水平的提高，我国PCa的发病率呈现逐年增高的趋势[3]。早诊断、早发现、早治疗PCa，可有效改善临床预后，降低发病率及病死率。传统的早期诊断PCa是通过检测患者血清中前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平来实现，但该方法的特异度及灵敏度均不高[4-5]。为此，寻找一种特异度及灵敏度均高的PCa早期诊断分子标志物，对于PCa的诊断、预后及治疗具有重要意义。作为GATA转录因子家族的GATA3，其羧基端具有2个锌指模型结构，发挥抑癌基因的作用，在维持内皮细胞生物学功能方面具有重要作用[6-7]。研究表明，GATA3在许多组织和细胞如T淋巴细胞、胸腺细胞、乳腺的腺上皮细胞、交感神经系统以及皮肤毛囊中，具有促进细胞增殖、分化的重要作用，同时在参与多种人类肿瘤的分级、分化、转移进程[8-10]。本研究将采用免疫组化法检测GATA3在PCa及良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）组织中的表达，分析其表达与临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年3月～2015年12月内蒙古自治区人民医院病理科存档的92例PCa穿刺活检患者标本为PCa组及患者年龄相匹配的60例BPH蜡块为BPH组，标本经两名以上资深病理医师确诊。纳入标准：依据《前列腺癌诊断标准》（WS336-2011）[11]。排除标准：①曾接受抗雄激素及放疗处理；②合并其他恶性肿瘤疾病；③既往有前列腺手术史及合并其他严重内科疾病者。92例PCa患者均为男性，年龄48～86岁，平均（59.27±10.94）岁。病理类型：按照Gleason评分进行病理分级[12]，高分化（Gleason 2～4分）22例；中分化（Gleason 5～7分）36例；低分化（Gleason 8～10分）34例。TNM临床分期[13]：T1期30例，T2期22例，T3期30例，T4期10例；N0期84例，N1期8例；M0期82例，M1期10例。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化 石蜡标本切片厚度为5 μm。采用免疫组化法检测，经脱蜡、脱水、抗原修复及染色，辣根过氧化物酶标记，苏木精复染等操作。实验步骤均严格按照试剂盒操作说明进行。鼠抗人GATA3单克隆抗体为福州迈新生物技术开发有限公司产品（型号MAB-0142）。即用型快速免疫组化检测试剂盒（鼠）为福州迈新生物技术开发有限公司产品（型号806180031）。抗体滴度为1∶50。以试剂公司提供的阳性对照片作为阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.2.2 结果判定 GATA3蛋白因子主要表达于细胞核，呈棕黄色，背景不着色。由两位有经验的病理医师采用双盲法独立评估结果，均按照半定量积分法评分，每例均随机观察5个高倍视野（400×），进行半定量积分判定。①按阳性细胞率：阳性细胞<5%为0分，5%～25%为1分，>25%～50%为2分，>50%～75%为3分，>75%为4分；②按细胞染色强度：无着色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。将细胞阳性率与染色强度两者积分相乘：0～1分为阴性（-），2～4分为弱阳性（+），5～8分为度阳性（++），9～12分为强阳性（+++）。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件对实验数据进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，检验值在临界状态时采用四格表精确概率法，等级资料采用秩和检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 GATA3在PCa及BPH组织中的表达

免疫组化染色结果显示，GATA3蛋白着色于细胞核，呈现棕黄色阳性表达；PCa组患者中GATA3的阳性表达率高于BPH组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见图1、表1。

2.2 PCa患者GATA3蛋白表达与临床病理特征的关系

PCa患者GATA3蛋白表达的阳性率随着Gleason评分增高、TNM分期越晚及血清PSA浓度增大而升高，差异有统计学意义（P < 0.05），而GATA3蛋白的表达阳性率在不同年龄组、淋巴结是否发生转移间差异无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

3 讨论

近年来，PCa在我国的发病率呈上升趋势。由于PCa的病程长，起病隐匿，患者因尿路症状就诊时发现，但往往已经进展到晚期，错过治疗的最佳时期。所以，对于早期诊断PCa十分重要。目前我国对于PCa的診断性初筛主要依靠于对血清PSA值的测试，但PSA值在灰区（4.0～10.0 ng/mL）时的灵敏度与特异度降低，则难以区分PCa与BPH[14-15]。

随着PCa的分子生物学、肿瘤学以及免疫组化相关研究的发展，多种细胞因子、蛋白分子等共同参与PCa的发生和发展，与其预后评价有非常密切的关系。GATA3是GATA转录因子家族中的一员。研究表明，GATA3促进多种组织的正常发育、分化及增殖，GATA3促进T细胞的发展及向Th2细胞分化[16-17]。GATA3对于非造血细胞的发育同样重要，如交感神经系统、肾脏、脂肪细胞、耳蜗及毛囊等[18]。GATA3在肿瘤分化进程中发挥关键的调节作用，若其缺失，则会加速伴有大量GATA3阴性肿瘤细胞的肿瘤扩散[19]。据报道，乳腺癌及结直肠癌组织中GATA3过表达且与肿瘤恶性进程相关[20]。近期研究提示，GATA3在膀胱小细胞癌呈现阳性反应，且在区分前列腺及膀胱起源的小细胞癌中具有潜在的诊断价值，同样在非小细胞肺癌中也具有诊断价值[21]。

本研究中，免疫组化染色结果提示，GATA3主要定位于细胞核，呈现棕褐色阳性表达；与BPH组患者相比，PCa组中的GATA3的阳性表达率显著升高。这说明GATA3在PCa的进程中发挥重要作用。Liu等[22]曾采用免疫组化技术检测GATA3在不同肿瘤及正常组织中的表达情况，结果显示，86%的尿路上皮癌和94%的乳腺癌GATA3表达阳性，认为GATA3可潜在作为乳腺及尿路上皮癌的特异性标记。此外，本研究还表明，PCa患者中GATA3蛋白表达的阳性随着Gleason评分增高、TNM分期越晚、血清PSA浓度增大而增强，这提示GATA3在PCa恶变进程中扮演着重要角色；GATA3蛋白表达的阳性率在不同年龄组及淋巴结是否发生转移间的表达差异不大，这也许与本研究纳入样本量偏少有关。

综上所述，PCa组织中GATA3阳性表达率高于BPH组织，且随着分化进程，TNM分期越晚及PSA浓度增高而出现表达增强，提示GATA3可能对PCa的发生、发展起促进作用，有望作为潜在的PCa诊断及治疗的有效靶点。

[参考文献]

[1] Gr■nberg H，Adolfsson J，Aly M，et al. Prostate cancer screening in men aged 50-69 years（STHLM3）：a prospective population-based diagnostic study [J]. Lancet Oncol，2015，16（16）：1667-1676.

[2] Akram ON，Mushtaq G，Kamal MA. An overview of current screening and management approaches for prostate cancer [J]. Curr Drug Metab，2015，16（8）：713-718.

[3] 齐金蕾，王黎君，周脉耕，等.1990～2013年中国男性前列腺癌疾病负担分析[J].中华流行病学杂志，2016，37（6）：778-782.

[4] Prcic A，Begic E，Hiros M. Usefulness of total PSA value in prostate diseases diagnosis [J]. Acta Inform Med，2016，24（3）：156-161.

[5] Kirby R. The role of PSA in detection and management of prostate cancer [J]. Practitioner，2016，260（1792）：17-21，3.

[6] 谢轶群，裔海鹰，施俊义，等.GATA3在乳腺癌中的表达及其与预后的关系[J].中国癌症杂志，2010，20（12）：911-914.

[7] Siddiqui MT，Seydafkan S，Cohen C. GATA3 expression in metastatic urothelial carcinoma in fine needle aspiration cell blocks：a review of 25 cases [J]. Diagn Cytopathol，2014，42（9）：809-815.

[8] Asselin-Labat ML，Sutherland KD，Barker H，et al. Gata-3 is an essential regulator of mammary-gland morphogenesis and luminal-cell differentiation [J]. Nat Cell Biol，2007，9（2）：201-209.

[9] Davis DG，Siddiqui MT，Oprea-Ilies G，et al. GATA-3 and FOXA1 expression is useful to differentiate breast carcinoma from other carcinomas [J]. Hum Pathol，2016，47（1）：26-31.

[10] Keshari RP，Wang W，Zhang Y，et al. Decreased expression of the GATA3 gene is associated with poor prognosis in primary gastric adenocarcinoma [J]. PLoS One，2014，9：e87195.

[11] 王行环，刘同族.提高认识规范诊疗-《前列腺癌诊断标准》解读[J].中国卫生标准管理，2011，2（4）：25-27.

[12] Mai ZP，Yan WG，Li HZ，et al. Clinical characteristics and outcome of gleason score 10 prostate cancer on core biopsy treated by external radiotherapy and hormone therapy [J]. Chin Med Sci J，2015，30（2）：90-94.

[13] Wang Q，Zhang JG，Wang W. Expression and significance of S100P，CD147，and OCT4 in different prostate cancer tissue TNM stages [J]. Genet Mol Res，2015，14（2）：6844-6851.

[14] 吳杰，赵睿哲，黄源，等.PSA“灰区”前列腺癌预测模型及随访系统的建立[J].中华泌尿外科杂志，2016，37（4）：280-283.

[15] 王炜，李传刚，刘辉，等.前列腺特异性抗原对前列腺癌诊断价值的探讨[J].中国医科大学学报，2016，45（1）：61-65，69.

[16] Zhu YF，Hu JZ，Zhao PN，et al. All-transretinoic acid regulates Th1/Th2 balance in CD4+ T cells when GATA-3 is deficient [J]. Biomed Environ Sci，2013，26（9）：774-777.

[17] Kaufman CK，Zhou P，Pasolli HA，et al. GATA-3：an unexpected regulator of cell lineage determination in skin [J]. Genes Dev，2003，17（17）：2108-2122.

[18] Tsarovina K，Pattyn A，Stubbusch J，et al. Essential role of Gata transcription factors in sympathetic neuron development [J]. Development，2004，131（19）：4775-4786.

[19] Chou J，Provot S，Werb Z. GATA3 in development and cancer differentiation：cells GATA have it！ [J]. J Cell Physiol，2010，222（1）：42-49.

[20] Kouros-Mehr H，Bechis SK，Slorach EM，et al. GATA-3 links tumor differentiation and dissemination in a luminal breast cancer model [J]. Cancer Cell，2008，13（1）：141-152.

[21] Bezerra SM，Lotan TL，Faraj SF，et al. GATA3 expression in small cell carcinoma of bladder and prostate and its potential role in determining primary tumor origin [J]. Hum Pathol，2014，45（5）：1682-1687.

[22] Liu H，Shi J，Wilkerson ML，et al. Immunohistochemical evaluation of GATA3 expression in tumors and normal tissues [J]. Am Soc Clin Pathol，2012，138（1）：57-64.

（收稿日期：2016-10-02 本文编辑：李亚聪）