王琳 杨晓勤 陈云

[摘 要] 为了改进水稻叶片蛋白的双向电泳分离方法，采用双向电泳法分离水稻叶片蛋白，比较和分析了两种上样量对实验的影响。改进的上样量灵敏度高，分离条带多且清晰，表明改进的实验方法可以得到更为灵敏、清晰的图谱，能更好地适应和促进实验教学工作。

[关键词] 实验教学;改进;双向电泳;叶片

[中图分类号] Q503     [文献标识码] A    [文章编号] 1674-9324（2020）41-0383-02    [收稿日期] 2020-04-02

目前，双向电泳技术是研究蛋白组学十分重要的技术手段，特别是以固相pH梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高，信息量最大的电泳技术。它具有结果直观，分辨率较高，信息量大，技术成熟等优点，因此，此实验也成为本科生生物化学实验中的基础性实验，是生物化学实验教学的重要内容。

在双向电泳中，上样量大小取决于样品中蛋白质的种类、数目、检测方法的灵敏度及胶条的pH梯度范围和长度。不同样品中蛋白的种类、数目有一定差异，所以在检测方法相同，一向IPG胶条pH梯度范围和长度相同的条件下，不同样品的蛋白上样量有差异。为了获得一个分辨效果好和重复性好的双向电泳图谱，得到质量高的水稻叶片蛋白电泳分离效果，找出合适的蛋白上样量很重要。作者在使用双向双向分离水稻叶片蛋白实验的传统方法时发现，根据原来的蛋白上样量分离的蛋白斑点较少且模糊。为了提高水稻叶片蛋白的电泳分离效果，本文对此进行了探讨。……