何艳丽 王延辉 陈方园 孙平飞 徐年军

摘要 [目的]研究浒苔代谢产物的提取方法。[方法]以浒苔为研究对象，用不同的细胞破碎方式、溶剂提取体系、料液比等对均一样本的代谢产物进行提取，气相色谱-质谱法（GC-MS）鉴定代谢产物成分，利用主成分分析等方法，对不同的代谢提取体系进行评价。[结果]溶剂体系甲醇-三氯甲烷-水（7∶3∶3）和液氮处理-球磨破碎-超声波的破壁方法提取并鉴定出81种代谢产物，该方法具有高提取产率、高重现性、易操作和速度快等优点。[结论]溶剂体系甲醇-三氯甲烷-水（7∶3∶3）和液氮处理-球磨破碎-超声波破壁是适合浒苔代谢物提取的方法，该方法可为浒苔及大型绿藻的代谢组学研究提供参考。

关键词 浒苔；提取方法；气相色谱-质谱；代谢产物

中图分类号 S986.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）13-0072-04

Metabolite Profiling of Seaweed Enteromorpha Using Gas Chromatography-Mass Spectrometry

HE Yan-li1，2， WANG Yan-hui1， CHEN Fang-yuan1， XU Nian-jun2* et al

（1. School of Pharmaceutical Engineering， Zhejiang Pharmaceutical College， Ningbo， Zhejiang 315100； 2. School of Marine Sciences， Ningbo University， Ningbo， Zhejiang 315211）

Abstract [Objective] To study the extraction method of Enteromorpha metabolites. [Method] Enteromorpha as the research object， using different cell crushing methods， solvent extraction system， solid-liquid ratio， the homogeneous sample metabolites were extracted； the metabolites were identificated by GC-MS； using principal component analysis method， different metabolic extraction systems were evaluated. [Result] A total of 81 metabolites were extracted and identified by the solvent system of methanol∶chloroform∶water （7∶3∶3） and liquid nitrogen treatment-milling-ultrasonic breaking method， showing high extraction yield， high reproducibility， easy operation and fast and other characteristics. [Conclusion] It is a suitable method for extracting metabolites of Enteromorpha which can provide reference for metabonomics study of Enteromorpha and large green algae.

Key words Enteromorpha；Extraction method；GC-MS；Metabolite

滸苔（Enteromorpha）亦称苔条、苔菜，属绿藻纲石莼科，为大型海洋绿藻，广温、广盐、耐干旱，在我国近海广泛分布。在适合条件下容易出现爆发型增殖，给水产养殖造成严重困扰，其生态危害受到广泛关注。同时浒苔又有较高的营养价值，浒苔“烧末吹鼻止衄血，汤浸捣敷手背肿痛”，具有软坚散结、化痰消积、解毒消肿等作用；浒苔富含蛋白质、纤维素、碳水化合物和维生素等营养成分，在日韩等国家作为中高档的佐料消费[1]，且价格昂贵。

浒苔在近海中的绿潮爆发极具规律：每年4、5月份在山东、江苏、浙江等局部海域爆发，爆发期间对当地水产养殖造成极大损失[2]，对近海环境也产生不良影响，而其他时间附近海域则较少出现。……