刘明浩　姚丽



·技术应用·

血清AFP、AFP-L3及GP73三者联合检测在原发性肝癌诊断中的应用探究

刘明浩1姚丽2

【摘要】目的 探讨和分析血清甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）、高尔基体蛋白（GP73）三者联合检测在原发性肝癌诊断中的应用价值。方法 选取40例肝癌患者（A组）、40例肝脏良性疾病患者（B组）和40例健康志愿者（C组）作为此次研究的对象，分别采用电化学发光法、微量离心柱法和酶联免疫吸附法（ELISA）对上述对象血清中AFP、AFP-L3及GP73进行检测。结果 C组血清均未检出AFP、AFP-L3、GP73，A组和B组上述指标血清含量均明显高于对照组（均P＜0.05）；A组AFP-L3和GP73血清检测阳性率分别为70%和77.5%，与AFP血清检测阳性率比较差异具有统计学意义（P ＜0.05），但显著低于AFP、AFP-L3和GP73联合检测的血清阳性率（P＜0.05）；AFP、AFP-L3及GP73三者联合检测的敏感度、特异度分别为96.4%、88.4%，显著优于上述指标单独检测的敏感度、特异度（均P＜0.05）。结论 AFP、AFP-L3及GP73三者联合检测在原发性肝细胞癌联诊断中具有重要意义，提高阳性检出率的同时还具有较好的敏感度和特异度。

【关键词】原发性肝癌；甲胎蛋白；甲胎蛋白异质体；高尔基体蛋白73；诊断价值

原发性肝癌（PHC），亦简称肝癌，是指原发于肝脏或肝内胆管系统的癌，临床常见的恶性肿瘤之一，由于起病隐匿，进展迅速，一经发现常处于病情晚期，治疗上十分棘手，病死率极高。研究显示，与原发性肝癌密切相关的肝炎病毒主要为乙型肝炎病毒（HBV），而我国作为乙肝大国，发病人数已经达到全球发病人数的一半以上［1］。因此尽可能早的准确诊断对于后续的治疗、提升患者生存质量及改善预后等都具有十分重要的意义。血清甲胎蛋白（AFP）检测对于原发性肝细胞癌的诊断价值，已经为大量临床实践所证实。其早期诊断意义也为人们所公认，但阳性率不是很高，30%～40%的PLC患者呈阴性或低浓度，临床诊断容易出现漏诊或误诊［2］。近年来有研究指出AFP-L3及GP37为重要的肿瘤标记物，在PLC的诊断中具有重要意义。本研究旨在探讨AFP、AFP-L3及GP37三者联合检测在PLC诊断中的应用价值，现整理汇报如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2012年10月～2014年1月于我院进行治疗的40例原发性肝癌患者作为A组，患者作为所有患者均经CT、病理及细胞学检查并结合临床诊断等均符合原发性肝细胞癌临床诊断与分期标准［3］。其中男性23例，女性17例，年龄范围42～78岁，平均年龄（52.8±12.4）岁，Child-pugh分级均为A级和B级。选择同期入院的肝脏良性疾病患者40例作为B组，其中男性22例，女性18例，年龄范围41～76岁，平均年龄（52.2±11.7）岁，慢性肝炎例25，肝硬化15例。另选取40例健康志愿者作为C组，其中男24例，女性16例，年龄范围40～76岁，平均年龄（50.4±10.3）岁。

1.2方法

患者准备空腹10～12 h；避免情绪紧张；停止服用可能影响检测结果的药物。静脉取血3～5 ml于肝素真空采血管。运送过程中不要剧烈震动，避免过大的温度变化。血液标本采集后应尽快（0.5 h内）以2 500～3 000 r/min离心5～8 min，分离血清后上机检测。如标本不能及时检测，置于-80℃保存。AFP采用电化学发光法检测，免疫化学发光仪（i 2 000）及配套试剂由雅培公司提供，（+）：≥20μg/L，（-）：＜20μg/L。AFP-L3采用微量离心柱法，试剂盒由南京英科新创生物技术公司提供，（+）：≥10%，（-）：＜10%。GP73采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测，试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，（+）：≥150 μg/L，（-）：＜150 μg/L。

1.3统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行实验数据分析，正态计量数据用（±s）表示，正态资料组间比较采用t检验，样本率的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1不同组别血清AFP、AFP-L3、GP73检测结果比较

C组血清均未检出AFP、AFP-L3、GP73，A组和B组上述指标血清含量均明显高于C组（均P＜0.05），具体详见表1。

2.2不同组别血清检测阳性率比较

A组AFP-L3和GP73血清检测阳性率分别为70%和77.5%，与AFP血清检测阳性率比较差异具有统计学意义（P＜0.05），但低于AFP、AFP-L3和GP73联合检测的血清阳性率（P＜0.05），具体详见表2。

2.3不同检测方法敏感度、特异性比较

AFP、AFP-L3及GP73三者联合检测的敏感度、特异度分别为96.4%、88.4%，显著优于上述指标单独检测的敏感度、特异度（均P＜0.05），具体详见表3。

3　讨论

PHC是我国常见的消化系统恶性肿瘤，其死亡率仅次于胃癌和食管癌。自20世纪70年代开始以血清甲胎蛋白和超声显像的筛选广泛开展，对早期肝癌的诊断有了较大进步。早期诊断是检出适于根治的早期患者，进而延长生存的有效手段和重要关键点。临床AFP检测经受了时间考验，仍然是经典的筛检、诊断和考察疗效、预后判断的可靠指标。但存在敏感度、特异性较低的问题，因此寻找其他肿瘤标志物对肝癌患者进行诊断至关重要［4］。

表1　不同组别血清AFP、AFP-L3、GP73检测结果比较

表2　不同组别血清检测阳性率比较［n（%）］

AFP是一种癌胚相关蛋白，是在人和动物胚胎发育过程中所特有的一种蛋白质。出生后及正常人血清中没有或仅有微量AFP［5］。但在部分良性肝病、生殖系统畸胎瘤、胃肠道部分恶性肿瘤甚至妊娠时也可升高。AFP是一种糖蛋白，不同来源的AFP其糖链的组成和构型存在差异，即异质体［6］。现已发现慢性肝病患者血清中的大部分AFP分子均不能与小扁豆凝集素（LCA）结合，而肝细胞癌产生的AFP异质体（AFP-L3）与小扁豆凝集素结合的比例很高，某些卵黄囊肿瘤和转移性肝癌患者血清中AFP也可以升高，其AFP-L3基本上可与小扁豆凝集素结合。因此与AFP联合检测对于鉴别细胞良恶性病变，具有较好的诊断鉴别意义。此外，AFP-L3用于HPC的诊断不受影像学阴性结果的于扰，有助于影像学对占位性疾病的鉴别（良恶性、肝内肝外性、转移性）和监视低浓度AFP患者病情进展［7］。GP73是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白。在正常人肝组织中，GP73主要由胆管上皮细胞表达，而肝细胞表达很少甚至不表达。不管是由病毒是由非病毒原因引起的肝病患者中，GP73水平均显著上调。研究证实其在HPC早期诊断中具有较好的特异度和敏感度，可分别达69%和75%，优于AFP检测［8-9］。本研究结果表明，肝癌患者血清中AFP、AFP-L3及GP73含量显著高于良性肝病和健康人群（P＜0.05），且三者的联合检测阳性率高于AFP阳性率，敏感度特异度提高至96.4%、88.4%。

表3　不同检测项目敏感度、特异性比较

综上所述，AFP、AFP-L3及GP73三者联合检测在原发性肝细胞癌联诊断中具有重要意义，提高阳性检出率的同时还具有较好的敏感度和特异度。

参考文献

［1］ 陈俊，王利健，骆剑明，等. 甲胎蛋白异质体在原发性肝癌中的诊断价值［J］. 中国卫生检验杂志，2012，22（11）：2673-2677.

［2］张宁宇，吕向阳，穆彩琴，等. AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义［J］. 中外健康文摘，2013（29）：205-206.

［3］许文芳，费迎明，周建康，等. 血清GP73、AFP和AFP-L3联合检测在原发性肝癌诊断中的价值［J］. 中华实验和临床病毒学杂志，2011，25（4）：286-288.

［4］毛一雷，杨华瑜，徐海峰，等.新的肝癌血清标记物GP73在肝癌诊断中的初步研究［J］.中华医学杂志，2008，88（14）：948-951.

［5］黄海深，周永均，何兰香，等. 微量离心柱法检测肝癌患者血清甲胎蛋白异质体临床意义分析［J］. 检验医学与临床，2014（3）：307-309.

［6］赵运胜，廖飞，李洪臣，等. GP73和 AFP-L3在甲胎蛋白低浓度肝癌诊断中的临床意义［J］. 重庆医科大学学报，2014（1）：22-25.

［7］Jemel A，Bray F，Center MM，et al. Global cancer stastics［J］. CA Cancer Clin.，2011，61（2）：69-90.

［8］石玉玲，曾兰兰，李林海，等. 高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值［J］. 中华检验医学杂志，2010，33（6）：507-512.

［9］Shi Y，Chen J，Li L，et al. A study of diagnostic value of golgi protein GP73 and its genetic assay in primary hepatic carcinoma［J］. TechnolCancer Res Treat，2011，10（3）：287-294.

【中图分类号】R373

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9308（2016）17-0038-03

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.17.023

作者单位：1 湖北省襄阳市职业病防治院检验科，湖北 襄阳 441021；2 湖北省襄阳市中心医院普外科，湖北 襄阳 441021

Diagnostic Value of The Combination With Detection of AFP，AFP-L3 and GP73 in Primary Liver Cancer

LIU Minghao2YAO Li21 Clinical Laboratory， The Prevention and Treatment of Occupational Diseases of Xiangyang City， Xiangyang Hubei 441021， China， 2 Department of General Surgery， The Central Hospital of Xiangyang City， Xiangyang Hubei 441021， China

［Abstract］Objective To investigate and analyze the application value of combined detection of serum alpha （AFP）， alpha fetal protein （AFP-L3） and Golgi protein （GP73） in the diagnosis of primary hepatic cancer. Methods We Selected 40 cases of HCC patients （group A）， 40 cases of benign liver disease patients（group B）and 40 cases of healthy volunteers （group C）as the research object. The serum levels of AFP， AFP-L3 and GP73 were detected by electrochemical luminescence， micro column and enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Results AFP， AFP-L3， GP73 were not detected in the serum of patients with C group.But group A and B were significantly higher than those in the control group， and the difference was statistically significant （P＜0.05）. The positive rates of AFP-L3， GP73 in group A were 70%and 77.5%. Compared with the positive rate of AFP serum detection， the difference was statistically significant （P＜0.05）. But significantly lower than the positive rate of AFP，AFP-L3 and GP73，the difference was statistically significant （P＜0.05）. The sensitivity and specificity of the combined detection of AFP，AFP-L3 and GP73 were 96.4%，88.4%，they were better than those of the above indexes，the difference was statistically significant （P＜0.05）. Conclusion The combined detection of AFP，AFP-L3 and GP73 had important significance in the diagnosis of primary hepatic cancer， which could significantly improve the patient positive test results， while ensure a better sensitivity and specificity. ［Key words］ Primary hepatocellular cancer， AFP， AFP-L3， Golgi protein 73， Diagnostic value