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过表达IGF-1对脐带间充质干细胞氧化损伤的抑制作用*

2016-07-05冯业童刘朋飞

中国病理生理杂志 2016年1期
关键词:细胞凋亡

赵 雷, 陈 昕, 冯业童, 刘朋飞

(暨南大学第二临床医学院,深圳市人民医院 1 麻醉科, 2检验科,广东 深圳 518020; 3中山大学人类病毒学研究所,广东 广州 510080; 4吉林大学药学院再生医学系,吉林 长春 130021)

过表达IGF-1对脐带间充质干细胞氧化损伤的抑制作用*

赵雷1,陈昕2,冯业童3,刘朋飞4△

(暨南大学第二临床医学院,深圳市人民医院1麻醉科,2检验科,广东 深圳 518020;3中山大学人类病毒学研究所,广东 广州 510080;4吉林大学药学院再生医学系,吉林 长春 130021)

[摘要]目的: 分析过表达胰岛素样生长因子1(IGF-1)对脐带间充质干细胞(UC-MSCs)氧化损伤的抑制作用,开发UC-MSCs新的应用模式。方法: 通过酶消化法,从脐带组织中分离UC-MSCs,并采用流式细胞术对细胞的表面特异标志物进行鉴定,通过逆转录病毒感染体系,构建过表达IGF-1的UC-MSCs(UC-MSCs-IGF-1),并进一步通过实时荧光定量PCR和流式细胞术对UC-MSCs-IGF-1的IGF-1表达水平进行评价,同时分析UC-MSCs-IGF-1的表面标志物及成骨成脂分化能力;用不同浓度的H2O2(0 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L)处理细胞,分析UC-MSCs-IGF-1在增殖活力维持、抗氧化损伤和抗凋亡方面的优势。结果: UC-MSCs表面标志物CD29、CD90和CD105的表达均呈阳性,而CD34的表达为阴性,符合正常间充质干细胞的表型特征;实时荧光定量PCR和流式细胞术结果表明,应用逆转录病毒感染体系构建的UC-MSCs-IGF-1在IGF-1表达方面远高于正常UC-MSCs,同时干细胞表型与UC-MSCs一致,且具备正常的成脂成骨分化能力;在H2O2的氧化损伤作用下,与UC-MSCs相比,UC-MSCs-IGF-1具有较强的增殖活力和抗氧化、抗凋亡功能,同时细胞中的SOD活性略高于UC-MSCs。结论: 过表达IGF-1对UC-MSCs的氧化损伤及氧化引起的凋亡均具有一定的防护作用,与正常UC-MSCs相比,UC-MSCs-IGF-1可能在临床应用方面具有一定的优势。……

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