林晓滨，　陈　颖，　杨德壕，　谢甬淋，　毕　涌，　柯建明，　陈志博，　苏中钱，　厉　向，　张　旭△

(温州医科大学附属第一医院 1超声影像科，2神经内科，浙江 温州 325000； 3武警浙江省总队杭州医院康复科，浙江 杭州 310000)

脂肪源性干细胞对多发性硬化患者Th17的免疫调控作用*

林晓滨1，陈颖2，杨德壕2，谢甬淋3，毕涌2，柯建明2，陈志博2，苏中钱2，厉向2，张旭2△

(温州医科大学附属第一医院1超声影像科，2神经内科，浙江 温州 325000；3武警浙江省总队杭州医院康复科，浙江 杭州 310000)

[摘要]目的： 探讨人脂肪源性干细胞(hASCs)对多发性硬化(MS)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)的免疫调控作用机制。方法: 分离、纯化脂肪组织中的hASCs。采用密度梯度离心法分离MS患者外周血单个核细胞(PBMCs)，磁珠分选CD4+T细胞，体外刺激细胞向Th17极化，并加入不同比例的hASCs(hASCs∶CD4+T为1∶4和1∶10)共培养4 d，设立添加anti-LIF抗体组；流式细胞术检测共培养后Th17细胞占CD4+T细胞的比例，real-time PCR检测白细胞介素6受体(IL-6R)、白细胞介素23受体(IL-23R)、白血病抑制因子受体(LIFR)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)及白血病抑制因子(LIF)的mRNA水平变化；ELISA法检测共培养体系上清液中LIF的水平。结果: 分离的hASCs经流式细胞术鉴定可基本判定为hASCs；PBMCs经磁珠法分选后获得90%以上纯度的CD4+T细胞。共培养后，1∶4组和1∶10组中Th17细胞所占比例下降，且存在高浓度抑制效应；共培养后RORγt、IL-6R和IL-23R的mRNA表达水平下降，LIFR和LIF的mRNA表达水平均升高；加入anti-LIF抗体后，Th17细胞比例回升至对照组水平；RORγt和IL-6R的mRNA表达水平回升；ELISA检测各组LIF的水平，共培养组LIF分泌均较对照组明显增多，加入anti-LIF抗体后明显减少。结论: hASCs可抑制MS患者Th17细胞的分化，其作用可能与其分泌LIF、通过IL-6/LIF轴竞争性抑制有关。……