兰清秀 ，柯斌榕 ，马 璐 ，卢政辉 **，范青海

（1．福建省农业科学院食用菌研究所，福建 福州 350014；2．特色食用菌繁育与栽培国家地方联合工程研究中心，福建 福州 350014；3．新西兰第一产业部植物与环境保护实验室，新西兰 奥克兰 1140）

害长头螨（Dolichocybe perniciosa） 隶属于蛛形纲（Arachnida）蜱螨亚纲（Acari）绒螨目（Trombidiformes） 长头螨科（Dolichocybidae），是食用菌的重要害螨之一；主要为害金针菇（Flammulina velutipes）、黑木耳 （Auricularia auricula）、毛木耳（Auricularia polytricha）、香菇 （Lentinula edodes）、银耳 （Tremella fuciformis） 和灵芝 （Ganoderma lingzhi）等木生型食用菌[1]。

我国学者邹萍对害长头螨的形态特征进行了详细描述，并对其生活史、为害习性和防治方法进行了简单阐述[2]。害长头螨属膨腹型螨类，其生活史与大部分螨类有明显差别，一生只有卵和成螨2个时期，无幼螨期和若螨期。成螨发育时后端膨大，形成膨腹体，膨腹体内产生数十粒至数百粒卵；卵在母体内直接发育为成螨，当膨腹体内绝大部分成螨从后半体端部钻出，母体发育终止[3]。18℃～28℃是害长头螨较适宜的繁殖发育温度。适宜的湿度范围较广，温度25℃，22%～92%相对湿度下，害长头螨均能完成膨腹繁殖[4]。该螨繁殖速度快，耐寒和耐饥能力强，喜温暖和潮湿的环境；当环境干燥时，会转入休眠状态，肉眼难以发现，一旦条件适宜，将会迅速爆发。该螨的危害贯穿于食用菌栽培整个周期，即可为害栽培种，还能侵染母种和原种[3]。害长头螨不仅取食菌丝和子实体，还能取食和传播木霉、黑孢霉、镰刀菌等杂菌，一旦发生，常令栽培者束手无策，造成重大经济损失[5-7]。由于害长头螨喜欢钻入培养料中取食，形成膨腹体进行繁殖，药剂不易直接接触到螨。

针对害长头螨的防治，目前主要是在菌丝培养阶段定时喷施消毒剂，如采用“炔螨特”进行空间消毒，减少虫源，并在开袋后使用阿维菌素加联苯菊酯喷雾等方法进行防治，但药剂防治常导致菌丝和子实体损伤，防治效果不佳[8-9]。食用菌生产者对该螨的防控处于被动状态，害长头螨的潜在威胁十分突显，然而我国目前对食用菌膨腹型螨类的生物学特性研究较少，急需加强有关膨腹型螨类繁殖发育规律和爆发为害预防措施的研究。

有关害长头螨在不同温度、湿度和寄主条件下的生长发育情况、雌成螨膨腹体的形成和寿命、抗逆能力、爆发性发生原因等的研究仅见少量报道[1-3]。主要原因在于害长头螨未膨腹时个体微小，雌螨长约为0.17 mm、宽约为0.10 mm，雄螨长约为0.14 mm、宽约为0.08 mm[1]。害长头螨形成膨腹体后，轻轻触碰就可能导致破裂。然而目前未见可行的观察方法，操作起来非常困难。为找到简便的观察方法，经过反复试验，摸索出了一种便于观察害长头螨发育繁殖过程的新方法切孔法。通过详细介绍该方法，旨在明晰害长头螨的繁殖发育特征，以及为膨腹型螨类的研究提供技术参考。

1 试验材料

1.1 供试螨

害长头螨，从福建省福州市罗源县金针菇菌包中获得，纯化后接入长满金针菇菌丝的玻璃培养皿或试管中，置于25℃、相对湿度为（75±5）%的无光照培养箱培养。

1.2 供试食用菌

试验用金针菇为福建省农业科学院食用菌研究所保存种。将食用菌菌丝接入直径3 cm、高1 cm，内含PDA（马铃薯∶葡萄糖∶琼脂=10∶1∶1） 培养基的塑料培养皿中，置于25℃、相对湿度为（75±5）%的培养箱中培养，待菌丝长满培养皿，备用。

1.3 试验方法

先将食用菌菌丝，接入装有已灭菌的PDA培养基的小培养皿上，待菌丝长满，在长满菌丝的培养基中间切一个直径为1 cm的圆孔，使圆孔壁倾斜30°～45°，然后用经过削细的鸭羽毛尖端（约0.2 mm），轻轻挑取1只或30只害长头螨雌成螨至圆孔中。培育条件为温度25℃。

2 结果与分析

2.1 害长头螨个体培养

将1只害长头螨雌螨接入长有金针菇菌丝的培养皿，重复20次。害长头螨雌螨个体培养发育周期见表1。

表1 害长头螨雌螨个体培养发育周期Tab.1 The reproductive cycle of Dolichocybe perniciosa female by individual feeding

从表1可以看出，24 h后超过60%的螨已固定位置取食。其余螨继续爬行，少数螨死亡。第3天，螨的活动趋于稳定，固定取食率达90%以上，膨腹率逐渐升高。第10天开始，膨腹体开始产出少量成螨，膨腹率在第15天达最高。温度25℃，相对湿度为（75±5）%条件，个体培养害长头螨，以有成螨爬出为标准，完成一代最快为10 d。

2.2 害长头螨群体培养

温度25℃，将从同一膨腹体内刚爬出的30只害长头螨雌螨接入内含金针菇菌丝，且中间切有小圆孔的培养皿内，重复4次。害长头螨雌螨群体培养发育周期见表2和图1。

表2 害长头螨雌螨群体培养发育周期Tab.2 The reproductive cycle of Dolichocybe perniciosa female by group feeding

从表2和图1可以看出，24 h后，雌螨陆续开始固定取食，固定在菌丝表面取食，最快48 h开始膨腹；第6天，可清晰观察到菌丝表面的膨腹体（图1a）。也可能固定在圆孔环壁上取食并膨腹，这时后端膨大的膨腹体刚好落在中间小圆孔内（图1b），通过生物显微镜便可清晰地观察到膨腹体内卵发育至成螨的整个过程。试验条件下，群体培养害长头螨，完成一代最快需要6 d～7 d[4]。

图1 害长头螨膨腹体Fig.1 Physogastric body of Dolichocybe perniciosa

3 讨论与结论

在食用菌栽培过程中，害螨常与害虫、病菌混合发生。目前已知对食用菌造成较严重危害的主要有粉螨科（Acaridae）、跗线螨科（Tarsonemidae）、矮蒲螨科（Pygmephoridae）、薄口螨科（Histiostomatidae） 和长头螨科（Dolichocybidae） 等螨类。其以若螨、成螨直接取食菌丝或子实体，甚至把菌丝吃光，同时传播大量病菌，造成不发菌或出现“退菌”现象，蛀食食用菌子实体根部形成空洞，影响鲜菇品质，造成重大经济损失。

食用菌上发生的大部分的螨类一生有卵期、幼螨期、前若螨期、后若螨期和成螨期5个时期。螨类常见的繁殖方式有两性生殖和孤雌生殖。然而害长头螨是膨腹型螨类，属营卵胎生，当其膨腹前即固定取食，不再移动位置，这与其他螨类的发育繁殖方式完全不同[10-12]。

试验表明，害长头螨群体培养时完成一代的时间比个体培养时间短，推测害长头螨喜群体生活，这也符合生产中害长头螨一旦爆发就成片为害的特点。如果雌螨不在圆孔的环壁上取食，可将已固定取食的膨腹体连同菌丝块一起挑至新的切有上述圆孔培养皿中，继续培养，即可清晰地观察到害长头螨在膨腹体内由卵发育至成螨的生长发育全过程，便于得到同一时期的大量螨源。

在实际操作过程中，经过重复验证，发现害长头螨常在环壁上固定取食，这便于害长头螨的观察和试验统计。然而将1只在菌丝表面已经固定取食的害长头螨膨腹体连同菌丝块一起挑至新的切有上述圆孔的培养皿中时，有些膨腹体经移动后发育延迟，有些则可正常发育，由此推断害长头螨个体对环境的变化有不同的敏感度，个体发育间可能存在差异。同样的环境条件下，害长头螨的膨腹体却形态多样，且个体的膨腹速度不完全一致[13]，导致这些情况的原因还不明确，有待进一步探究。

此外，试验观察到害长头螨取食白色的菌丝后，体色转为白色，按常规方法将害长头螨接入到长满白色菌丝的培养皿或菌袋中，需观察害长头螨膨腹体内卵至成螨的具体发育过程很困难，无法准确判断膨腹体内的卵和成螨的数量，无法获得试验所需的同一时期大量螨源，从而批量挑取成螨。这种观察新方法突破了这些难点。适用于膨腹型螨类，特别是取食食用菌菌丝的膨腹型螨类，如害长头螨、申菇长头螨、木耳卢西螨[14-15]的生物学特性研究，具有实际应用价值。