杜瑞 关炳峰 尹红娜 王珂 孙茜茜 陈世伟

摘要[目的]选择L-抗坏血酸和D-异抗坏血酸在高效液相色谱分离中最佳色谱柱。[方法]对比C18柱、HILIC酰胺柱、HILIC聚合物柱、HILIC硅胶柱、氨基柱和氰基柱6种色谱柱填料分析抗坏血酸对映体的分离度和流动相。[结果]HILIC酰胺柱分离度最大，为4.84;其次为氨基柱，分离度为2.80;流动相为0.1%磷酸水和乙腈。[结论]HILIC酰胺柱为分析抗坏血酸对映体的最合适色谱柱填料。

关键词高效液相色谱;L-抗坏血酸;D-异抗坏血酸;色谱柱

中图分类号O657.7+2文献标识码A

文章编号0517-6611（2020）04-0196-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.04.057

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Determination of Ascorbic Acid Enantiomer Column by High Performance Liquid Chromatography

DU Rui，GUAN Bing-feng，YIN Hong-na et al（Henan Commerce Science Institute Co.，Ltd.，Zhengzhou，Henan 450002）

Abstract[Objective]L-ascorbic acid and D-ascorbic acid were selected as the best chromatographic columns for HPLC separation.[Method]The C18 column，HILIC amide column，HILIC polymer column，HILIC silica column，amino column and cyano column were compared to analyze the ascorbic acid enantiomer resolution and mobile phase.[Result]The highest resolution of the HILIC amide column was 4.84;the second was the amino column with a resolution of 2.80;the mobile phase was 0.1% phosphoric acid water and acetonitrile.[Conclusion]HILIC amide column is the most suitable column packing for the analysis of ascorbic acid enantiomers.

Key wordsHPLC;L-ascorbic acid;D-isoascorbic acid;Chromatographic column

L-抗壞血酸（L-ascorbic acid）又称维生素C（Vitamin C），学名L-3-氧代苏己糖醛酸内酯[1]。L-抗坏血酸在人体内不能合成，主要存在于蔬菜和水果中，天然具有抗氧化性质，是一种营养强化剂和食品添加剂，广泛用于食品加工和保健品行业中[2-3]。D-异抗坏血酸（D-isoascorbic acid）是L-抗坏血酸的对映异构体，与L-抗坏血酸化学性质相似，但生理活性仅有L-抗坏血酸的1/20[4]。D-异抗坏血酸作为食品抗氧化剂和肉制品的防腐助色剂[2，5-6]，但摄入过多会造成白细胞的抗病能力下降，使人体受到伤害[7]。

由于L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸生理活性不同，因此对抗坏血酸对映异构体分析十分重要。在手性分析中，常用的分离手段有毛细管电泳法[8-10]和高效液相色谱法[11-15]。毛细管电泳分离方法虽然有很高的手性分析能力，但与HPLC相比柱容量小，造成不宜大体积高浓度进样;并且在食品安全检测方面，毛细管电泳没有高效液相色谱普及率高。笔者采用HPLC法测定抗坏血酸对映体，考察不同色谱填料（C18、HILIC、NH2、CN）对抗坏血酸对映体分离的影响。……