祝 喆

（抚顺县疾病预防控制中心，辽宁 抚顺 113007）

梅毒是一种临床常见的性病，传染性极强，致病原因为梅毒螺旋体感染，梅毒一般通过通过血液、胎盘垂直传播、性行为等途径进行传播[1]，对患者身体的危害不亚于艾滋病，使临床治疗难度增大。梅毒临床表现较复杂，主要是梅毒病原体通过血液与淋巴系统在人体中传播，使患者的脏器组织遭到极大损害，近几年来梅毒的发病率也呈现逐年增长趋势，目前已经被国家防治疾病管理归类于乙类病种，会对患者的身心健康于生命安全造成严重的影响[2]。梅毒在临床上常分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期，Ⅰ期患者以感染部位存在硬下疳和溃疡为主要表现，Ⅱ期患者易皮肤黏膜遭到严重损害为主要表现，Ⅲ期患者易组织器官受损严重为主要表现，并且致死率极高。但Ⅰ期与Ⅱ患者的临床症状未具备明显的特异性，临床上诊断时易出现误诊、漏诊现象，不能及时对患者的病情进行治疗和控制，致使病情发展到Ⅲ期危害到患者生命安全才得到重视，会增加临床后期治疗的难度和风险，因此需要尽早给予梅毒患者准确有效的诊断，对保障患者的预后具有重要的意义。临床不仅需要观察患者体征与结合性交史外，还需要依据实验室检查对患者病情进行准确的判断，目前临床上检测梅毒的主要诊断方法包括甲苯胺红不佳热血清试验法（TRUST）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）以及胶体金法[3]。其中由于TPPA法具有较高的特异度与灵敏度，临床上将TPPA法的检测结果常作为诊断梅毒的“黄金标准”，但该检测方法也存在费用高、操作繁杂等特点，致使大部分患者接受程度较低，使临床试验室检测梅毒转向TRUST、ELISA与胶体金法。基于此，本次研究选择了以120例TPPA阳性和120例TPPA阴性的血清样品为研究对象，旨在明确ELISA法梅毒抗体检测与TRUST试验在梅毒诊断中的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2014年1月至2018年12月以我中心经过梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）检测阳性的120例和TPPA阴性的120例血清样品为研究对象。其中男性77例，女性43例，年龄21～47岁，平均年龄为（35.35±3.28岁），所有血清样品状态均符合此次研究诊断标准。

1.2 方法：所有样品均采用TPPA 法确证，再进行ELISA法和TRUST法进行检测。首先选取试剂盒，分别是TPPA试剂盒（富士瑞必欧株式会社）、TRUST试剂盒（北京万泰生物药业股份有限公司）、ELISA试剂盒（英科新创（厦门）科技有限公司），抽取患者的空腹时的静脉血，并且将血清分离。同时在本市疾控中心提取梅毒质控血清试剂。以上所有试剂均处于有效期内，并且在有效期内使用。其次选择仪器，分别是微量移液器（单道多道数字可调微量移液器，上海求精生化试剂仪器有限公司）、洗板器（ANTHOS FLUID024.200型洗板器12道，Anthos Labtec Instruments GmbH）、37 ℃电热恒温培养箱（DHP-9162型，上海一恒科技有限公司）、酶标仪（ANTHOS READER 2010型多功能酶标仪，奥地利Anthos仪器公司）、BHC-1300ǁA/B型生物安全柜等，所有设备仪器都经过检验，保证能够正常运转。TPPA法、ELISA法和TRUST法均按照试剂盒中的操作说明进行。检测完毕后，读取检测结果。

1.3 观察指标：对比分析两种方法的检验特异度和检验灵敏度。梅毒现症患者的检测结果。灵敏度=真阳性人数/（真阳性人数+假阴性人数）×100%，特异度=真阴性人数/（真阴性人数+假阳性人数）×100%。

1.4 统计学方法：本次研究将通过SPSS.20.0统计软件来比较分析所有数据，计数资料以（%）表示，以χ2来进行组间检验，采用P＜0.05代表组间差异具有统计学意义。

2 结果

ELISA法检验检出阳性121例，阴性119例。其检验灵敏度为100.0%，检验特异度99.1%。采用TRUST法检验检出阳性82例，阴性158例.其检验灵敏度为66.7%，检验特异度98.3%。数据显示，ELISA法检验灵敏度明显高于TRUST法（χ2=39.952，P=0.000），两种方法的检验特异度差异不显著（χ2=0.249，P=0.618）。80名梅毒现症患者的血清样品ELISA法与TRUST法检测结果均为阳性。

3 讨论

梅毒是一种传染性极强的性疾病，危险性大，且病情难以控制且呈现多样化，因此临床在诊断时容易发生误诊、漏诊等情况[4]。临床治疗梅毒难度较大，梅毒患者感染上艾滋病的概率是正常人的五倍以上，该病的发生主要是由于患者机体受到梅毒螺旋体的感染而致，若未在患者早期对病情进行治疗与控制，使得患者病情蔓延，加重病情程度，会对患者机体组织器官造成严重损害，甚至出现衰竭、死亡等情况，危险性极高。近几年来由于现代人的思想逐渐开放，多数患者存在过早接触性生活和性生活不洁等现象，致使梅毒的发病率越来越高，临床和社会群众需要引起重视[5]。梅毒具备较高的传染性且有一定潜伏期，Ⅱ期梅毒与隐性梅毒的主要临床表现无明显的症状，大多为皮肤表现，常被患者和临床忽视。因此临床输血与术前应当加强对梅毒螺旋体额检测，一般情况下人体感染梅毒2周后，其血清学反应比较明显。临床上梅毒的检验方法比较多，每种方法都具备自身的检验和应用价值，而选择一种科学合理的方法对患者后续治疗至关重要。据相关研究表明[6]，TP特异性抗体检验梅毒的价值比较好，能够有效监测到梅毒的疗效，因此对梅毒进行特异性检验是有效的方法。

梅毒患者受到梅毒螺旋体感染之后，会出现一种类脂质抗体，可分为特异性和非特异性，因此临床诊断时多是对这两种抗体进行检测，以此来准确的判断患者是否存在梅毒感染情况。ELISA法就是对TP特异性抗体进行融组，采用酶联免疫吸附测定法以及双抗原夹心法来诊断梅毒，该方法简单有效，在临床上被广泛应用，因为ELISA法检验的对象选择的是IgM与IgG双抗体[7]，其敏感度以及特异性非常高，在具体操作中可以在同一时间内进行多份抗体检验，并将酶标仪作为标准，且使用的试剂比较便宜，一般来说临床检测结果都具备客观性，在计算机中输入原始数据，能够达到长期保存的作用。但是该方法在临床应用中也存在着一定的问题，即特异性抗体在非常短的时间内就会显现，而消失却需要较长的时间[8]，对患者进行梅毒治疗时依旧能够准确发现特异性抗体，若是在特定情况之下，会呈现出终生检出状态，由此说明ELISA法阳性仅能够表示患者正在被感染和曾经感染过，无法当作临床检测梅毒的最终疗效方法。

TRUST法是指在甲苯胺红溶液中放入VDRL进行炼制，检测血浆以及血清中的反应素，简单方便，易于操作，并且检出速度快，对于非梅毒螺旋体抗原血清试验方法敏感性和特异性较好，适用于大量人群的筛查。经充分治疗后，反应素可以消失。未经治疗的患者，其血清内的反应素可长期存在。可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。梅毒的预后诊断中的作用十分明显，先天性梅毒也比较适合用TRUST法进行检测。但是TRUST法也存在一定的问题，非梅毒螺旋体血清试验在普通人群中1%～2%的阳性率发生，通常阳性滴度小于1∶8，如急性发热性传染病，妊娠，吸毒，胶原性疾病（SLE，类风关结病）容易造成漏诊、误诊的情况，进而耽误患者的治疗，造成医疗纠纷的风险比较大。据相关报道显示，以潜伏期梅毒和Ⅰ期梅毒患者作为研究对象，TRUST法检测的敏感性较低，尤其是在晚期梅毒患者治疗之后，检测结果易出现阴性的现象，因此在早期和晚期梅毒患者的辅助诊断中效果欠佳，不过TRUST法在操作时比较简单，试剂较为廉价，在检测时的时间也比较短，不需要使用特定的仪器设备就能够测定患者的抗体滴度，可作为梅毒患者观察治疗效果的指标，若患者的治疗效果为显效时，TRUST法测定的抗体滴度则表现为下降趋势或呈现阴性，因此TRUST法可用作临床观察梅毒疗效与梅毒患者复查[9]。与ELISA法和TRUST法相比，TPPA抗原的抗体敏感性和特异性均高，作为非梅毒螺旋体抗原血清试验（如RPR等）初筛阳性标本的确证试验，能够作为梅毒患者的确诊试验，并且可测定梅毒效价，并且TPPA法和ELISA法检测有一致性，其主要检查对象是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应仍持续存在阳性，不能用于观察疗效。TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断，但是该方法成本较高，试剂昂贵且操作时间比较长，操作也比较复杂，所以临床上一般只会应用于小量检测，不适合大量标本筛选[10]。因此临床上对阳性测定的确诊试验常应用ELISA法与TRUST法。本次研究结果显示，ELISA法检验灵敏度明显高于TRUST法（P＜0.05）；两种方法的检验特异度无差异（P＞0.05），说明两种方法各具优势和劣势，ELISA法与TRUST法具备相关性，但也会存在假阴性与阳性的情况，主要是由于梅毒螺旋体在人体感染后，抗体表面抗原会对机体造成刺激，使其产生梅毒螺旋体特异性抗体，对于一些患者的血清中有内源性物质，若应用ELISA法检测会对结果造成一定影响，并且抗体效价下降与检验人员的操作能力也会影响到检查结果，因此临床检测和判定时需要综合考虑。

综上所述，ELISA法梅毒抗体检测与TRUST试验在梅毒诊断中均有一定的诊断价值和不同的优势，具体检测可以联合两种方法，简单有效，既能及时诊断患者疾病，又方便了梅毒确诊疗效观察，值得临床应用推广。