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(1.西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西杨凌 712100;2.陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌 712100)

产果胶酶黑曲霉的UV诱变及基于葡萄皮渣的固态发酵

黄丹梅1,宋育阳1,2,刘延琳1,2,秦义1,2,*

(1.西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西杨凌 712100;2.陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌 712100)

对产果胶酶的黑曲霉进行紫外诱变,使用透明圈法并结合液态发酵法进行筛选,获得果胶酶产量提高的黑曲霉菌株,并利用葡萄皮渣进行固态发酵生产果胶酶。结果表明,H40741、H40493、H40982、H41133、H41134、H41034、H40493和H22148等8株黑曲霉中,H40741产果胶酶最高,对其进行0～360 s紫外诱变,获得高产果胶酶突变菌株H40741-20,其在果胶液态发酵培养基中可获得酶活力为462.84 U/mL的果胶酶,是出发菌株的3倍。通过优化固体发酵培养基中的葡萄皮渣、麦麸和水的含量,获得较佳培养基配方为:葡萄皮渣50 g,麸皮50 g,水100 mL,硫酸铵2 g,硫酸镁0.07 g,硫酸钾0.1 g。H40741-20利用此固态培养基发酵,可获得酶活力为421.06 U/mL果胶酶,是出发菌株H40741的2.7倍。

果胶酶,黑曲霉,紫外诱变,固体发酵,葡萄皮渣

果胶在不同程度上影响天然产物的释放,在适宜条件下,添加果胶酶有利于天然产物的提取[1-2]。果胶酶是指能够分解果胶物质的一种复合酶的总称[3-6]。果胶酶包含聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、果胶裂解酶(pentin lyases,PL)、果胶甲酯酶(pectin esterases,PE)和原果胶酶等。

微生物生产果胶酶的来源极其广泛,包括真菌、细菌、放线菌,如:假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、欧文式菌(Erwinia)、酵母属(Saccharomyces)、曲霉属(Aspergillus)等[7-8]。黑曲霉是国际公认的安全菌株(generally regardedas safe,GRAS),也是美国(FDA)认可使用安全产酶微生物之一,其代谢产物可直接用于食品、饮料、造纸等行业[9-10]。……