徐文龙++孙位军++王张++刘光丽++梁源

【摘要】应用文献数据挖掘法，对比二十五味珍珠丸与保密方七十味珍珠丸的组方、化学成分、药理学和临床等现代研究信息，为七十味珍珠丸的药效物质基础和作用机制研究提供思路。挖掘出七十味珍珠丸的植物类药材12种，动物类药材5种，矿物类和宝石类药材8种，金属类药材4种，混合物1种，与二十五味珍珠丸共有的药物仅9种。二十五味珍珠丸中动植物类药物和矿物药类成分已建立含量测定方法，七十味珍珠丸中的矿物和金属类药材已建立含量测定方法，但植物药类尚未开展。七十味珍珠丸的药理作用研究较多，但作用机制研究不深入，而二十五味珍珠丸几乎没有开展作用机制研究。两者主要用于心脑血管和神经系统疾病的治疗，二十五味珍珠丸治疗疾病范围较七十味珍珠丸少，且两药多与其他药物配伍，均未见不良反应报道。

【关键词】七十味珍珠丸；二十五味珍珠丸；组方；药理；对比

【中图分类号】R29【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）04-0059-05

Comparison with the Modern Research Progress of The Rannasangpei and

Twenty Five Pearl Pill Based on Prescription Data MiningXU Wenlong1SUN Weijun1WANG Zhang2*LIU Guangli1LIANG Yuan1

1.College of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China；

2.College of Ethnomedicine，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，ChinaAbstract：With the application of literature mining，and through a comparison with twenty five pearl pill and the secret prescription of Rannasangpei formula，modern research information were mined and collected， to provide modern research of twenty five pearl pill and Rannasangpei. It is Revealed that Rannasangpei has twelve kinds of herbs，five kinds of animal medicinal materials，eight kinds of minerals and gems class，four kinds of metals，one kind of mixture， and there exists only 9 drugs shared by twenty five pearl pill and Rannasangpei. Methods for determination of certain contents in twenty five pearl pill has been set up，including plant and animal.Meanwhile，methods for determination of contents including minerals and metal medicinal materials in the Rannasangpei have been established and plant dont study. The Rannasangpei has always enjoyed various pharmacological effects without clear working mechanisms， but twenty five pearl pill almost clear working mechanisms. They are mainly used in the treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases as well as nervous system diseases， the scope of twenty five pearl pill treatment less and compatibility significantly， with few reports about adverse effects.

Keywords：Rannasangpei Pill； Twenty Five Pearl Pill； Component； Pharmacology； Comparison

二十五味珍珠丸和七十味珍珠丸均已被《中國药典》（2015版）收载。二十五味珍珠丸系藏族验方，最早收载于公元八世纪藏医巨著《四部医典》的第3部“秘诀部”中，主要用于中风、半身不遂、口眼歪斜、昏迷不醒、神智紊乱、谵语发狂等。七十味珍珠丸源于二十五味珍珠丸，经历代藏医药学家不断改进和完善，最后由藏医南方学派代表人物苏喀巴·年尼多杰于十五世纪中叶研制而成[1]；具有安神、镇静、通经活络、调和气血、醒脑开窍的功效，用于“黑白脉病 ”、“龙血”不调；中风、瘫痪、半身不遂、癲痫、脑溢血、脑震荡、心脏病、高血压及神经性障碍。目前，七十味珍珠丸在全国范围内仅有两家企业具有国药准字号，即西藏甘露藏药股份有限公司和青海金诃藏药厂；二十五味珍珠丸则有西藏神猴药业有限责任公司、西藏甘露藏药股份有限公司、青海金诃藏药厂、昌都藏药等企业具有国药准字号。

七十味珍珠丸与二十五味珍珠丸在药物组成上有较多相似之处，故通过化学成分、药理和临床研究的对比，能够为二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸的现代研究提供思路。

1组方数据挖掘

一般认为七十味珍珠丸来源于二十五味珍珠丸，因此进行两组数据挖掘并进行比较，可以挖掘出七十味珍珠丸处方中更多的药物信息，为多成分质量控制标准的制定提供基础。

11二十五味珍珠丸组方在《中国药典》（2015版）中，仅收载二十五味珍珠丸中组成药物，未记录其具体的各组方比例。其中植物类药材有19种，即肉豆蔻、草果、丁香、豆蔻、檀香、余甘子、肉桂、毛诃子、木香、冬葵果、荜拨、香旱芹、黑种草子、沉香、降香、红花、诃子、志达萨增、西红花；动物类药材有4种，即体外培育牛黄、人工麝香、螃蟹、水牛角浓缩粉；矿物类药材有4种，即石灰华、金礞石、珍珠、珍珠母。从药物数目来说，二十五味珍珠丸并非由25味药组成，而是27味，究其原因，可能是由于古代藏医缺乏植物分类学知识，将红花与西红花、珍珠与珍珠母分别视为同一种药物。

12七十味珍珠丸组方七十味珍珠丸为保密处方，仅公开了部分药物的名称，其具体的组方比例无从得知，阻碍了药效物质研究和质量控制水平的提高，如《中国药典》（2015版）所载的药物有珍珠、檀香、降香、九眼石、西红花、牛黄、麝香等[2]。

根据公开出版的文献，整理总结出七十味珍珠丸中植物类药材应有32种，已知12种即西红花[3]（藏红花[4]）、檀香、安息香、沉香、降香、短穗兔耳草（短穗兔草[5]）、甘草、天竺黄、木诃子、诃子、藏荆芥、荆芥等；动物类药材应有8种，已知5种即麝香（人工麝香）、野牛血、牛黄（人工牛黄）、羚羊角、熊胆等；矿物和宝石类药材应有20余种，已知8种即天然珍珠（珍珠）、九眼石、玛瑙、珊瑚、蓝宝石、猫眼石、松石[6]、青金石等；金属类药材应有10余种，已知4种即金、银、铜（铜灰）、天然铁等[7]；混合物1种，即佐台（坐台[8]）。总结发现，在组方中矿物和宝石类药材多达20余种，占比约29%。此外，各单位生产的七十味珍珠丸在部分药物的使用上存在差异，如有单位使用麝香、牛黄，而有些单位使用人工麝香和人工牛黄，另外各单位炼制佐台（佐塔）的工艺也不尽相同，这些都可能影响药效物质基础及药效。

13二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸的共有药物共有植物药6种，即檀香、沉香、降香、红花、西紅花、诃子；共有动物药2种，即牛黄（人工牛黄）、麝香（人工麝香）；共有矿物与宝石类药1种，即珍珠（人工珍珠）。由此可知，两者共有的药物仅9种，可能是因为七十味珍珠丸属于保密配方，尚未公布的药物中可能存在共有药物。

2化学成分研究

21二十五味珍珠丸的化学成分研究对部分药物的化学成分进行了研究，如应用HPLC测定西红花中的西红花苷I[9]、肉桂中的桂皮醛、木香中的木香烃内酯和去氢木香内脂[10]；应用RP-HPLC法测定人工牛黄中的人工牛黄胆酸[11]；通过原子吸收分光光度法测定了重金属元素含量，即平均含铅75720mg·kg-1、砷22626mg·kg-1、汞<0005mg·kg-1和镉01242mg·kg-1[12]；采用激光诱导击穿光谱（LIBS）技术对金属成分如钙、钠、钾、镁进行了定性分析[13]。而其它已知药物中的化学成分未见分析报道，究其原因可能是其在组方中含量较低，成分测试存在一定困难。

22七十味珍珠丸的化学成分研究只开展了矿物和金属成分的研究，如吴金泉等[14]采用LIBS对七十味珍珠丸Mg、Ca、Na、Fe、Al、Si、K、Li、Hg、Pb、Au等10种元素进行了定性研究，同时还对不同价态的Pb元素进行了LIBS的时间演化研究；李玉等[15]用ICP-AES法测定七十味珍珠丸中的微量和常量元素，测定出铜、铁、钴等多种元素的含量。见表1。

表1七十味珍珠丸中元素的含量/10-6

CuFeCoMnVZnMgPKNaCaAlCd535250050765125463385352388317256273700295502717262

23二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸的化学成分研究对比二十五味珍珠丸中矿物药数量和含量较七十味珍珠丸为少，共有金属钙、钠、钾、镁、铅、汞等元素，且含量各不相同；二十五味珍珠丸中的3个植物药与1个动物药已有含量测定指标，但未见七十味珍珠丸中动物药和植物药中化学成分的研究报道，有可能与组方中含量相对较低有关，其化学成分在仪器的检测限以下，也可因矿物药含量较多，干扰了动物药和植物药检测；另外处方保密对化学成分研究有较大的障碍。

3药理研究

31二十五味珍珠丸的药理研究二十五味珍珠丸能增加记忆再缺失小鼠模型的逃避潜伏期，并可减少小鼠发声和退缩的错误次数，表明珍珠丸能通过改善模型小鼠的记忆能力，提高其智力，从而改善痴呆症状[16]；制造颈总动脉结扎致大鼠不完全性脑缺血模型，二十五味珍珠丸预防给药可明显降低模型大鼠脑毛细血管通透性、脑含水量和脑指数，从而减轻脑水肿[17]；二十五味珍珠胶囊按504 g生药/kg·d（相当于临床给药量的70倍）灌胃60d以及停药2周后，动物的血液学指标、血液生化学指标及脏器指数没有明显异常，提示在临床规定剂量范围内是安全的[18]。

32七十味珍珠丸的药理研究七十味珍珠丸 05～1g/ kg 可明显减轻缺血性脑梗塞引起的行为障碍，减少梗塞面积，使缺血性脑组织病理变化减轻，对脑缺血有保护作用[19]。七十味珍珠丸治疗脑血管及神经系统疾病可能与其抑制脑内β-EP[20]、5-HT、NA、DA[21]的异常升高和海马神经元凋亡[22]有关；具有防治急性肾型高血压、中枢镇静、抗惊厥[23]、改善血液流变学[24]和血流动力学[25]、改善脑膜微循环[26]、减轻血小板聚集[27]、抗血栓形成[28]等药理作用，并可能通过抑制β-分泌酶[29]的表达来改善学习记忆[30]。

索有瑞等[31]通过模拟人工胃液发现，七十味珍珠丸中重金属元素汞、砷、铅、镉等吸收较少，大部分排出体外，机体内无明显长期蓄积性毒性。说明七十味珍珠丸中重金属元素并非机体正常生理所需要，但重金属元素在七十味珍珠丸中是怎样发挥作用尚未清楚，去除重金屬元素是否会影响药效也有待进一步研究。

33二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸的药理研究对比二十五味珍珠丸的药理学研究相对滞后，几乎没有开展作用机制研究。七十味珍珠丸现代药理学研究较多，主要集中在抗脑缺血及其初步机理研究方面，但作用机制研究需结合分子生物学、细胞生物学技术进一步深入。

4临床研究

41二十五味珍珠丸的临床研究主要用于血管性痴呆[32]、冠心病[33]、坐骨神经痛[34]、缺血性脑卒中[35]、椎动脉型颈椎病[36]、脑出血后遗症 [37]、急性高血压脑出血[38]等疾病，临床不良反应未见报道。详见表2。

表2二十五味珍珠丸的主要临床研究

主治临床观察血管性痴呆观察组（尼莫地平、甲磺酸二氢麦角碱缓释片、盐酸氟西汀胶囊，加用二十五味珍珠丸的综合治疗组）32 例和对照组（西药组）16 例。观察组19例明显好转，10 例好转，3例无效，总有效率9063%；对照组5例明显好转，7 例好转，4例无效，总有效率7500%。冠心病治疗组（珍珠丸组）和对照组（常规治疗组）各106例，两组均连续治疗8周。治疗组总有效率934%，对照组总有效率736%。坐骨神经痛二十五味珍珠丸治疗105例，其中痊愈92例，好转13例。缺血性脑卒中29例缺血性脑卒中病人口服二十五味珍珠丸，并设立常规治疗对照组（12例，阿司匹林、胞二磷胆碱）对照观察，二十五味珍珠丸治疗缺血性脑卒中8周时NIH评分为（607±274）分，疗效优于对照组的（425±205）分。椎动脉型颈椎病对照组32 例，治疗组32 例。在对照组（前列地尔注射液）治疗基础上加服二十五味珍珠丸，治疗组的总有效率9375%，对照组总有效率7500%。脑出血后遗症180例治疗组（二十五味珍珠丸）和对照组常规治疗，治疗组总有效率为956%，对照组总有效率为800%。急性高血压脑出血治疗组45例，对照组（香丹注射液）42例，治疗组总有效率为7778%，对照组总有效率为5714%。

42七十味珍珠丸的临床研究常用于缺血性脑卒中（脑缺血、中风、瘫痪、萨病、脑中风后遗症[39]、腔隙性脑梗塞[40]、脑溢血[41]）、脑震荡[42]、原发性高血压[43]、小儿抽搐[44]、面瘫、阿尔茨海默病[45]、神经血管性头痛[46]、植物神经功能紊乱[47]及心绞痛[48]等心脑血管和神经系统疾病，相当于藏医的“黑白脉病”的范畴。目前由治疗心脑血管疾病和神经系统疾病扩展到其它疾病，如小儿抽搐、风湿性关节炎等；七十味珍珠丸与其他中西药联合使用均取得满意效果，如治疗腔隙性脑梗塞与银杏叶注射液合用总有效率906%、治疗脑梗塞与二十五味珍珠丸合用总有效率为 967%。亦未见不良反应报道。

43二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸的临床研究对比二十五味珍珠丸与七十味珍珠丸均用于心脑血管和神经系统疾病的治疗，临床效果显著，但均未见不良反应报道。故应在现有基础上，采用多中心、大样本、随机、对照、双盲的现代临床实验研究七十味珍珠丸治疗心脑血管疾病的有效性和作用机制[31]。

5小结

51七十味珍珠丸与二十五味珍珠丸对比分析通过上述数据对比分析可知，在组方上七十味珍珠丸和二十五味珍珠丸共有植物药6种（檀香、沉香、降香、红花、西红花、诃子），动物药2种（牛黄、麝香），矿物与宝石类药1种（珍珠）。在化学成分上，两者均共同含有钙、钠、钾、镁、铅、汞等元素，均进行了对于矿物药的研究。二十五味珍珠丸由于其组方公开（组方比例未知），已进行如肉桂、西红花等植物药的化学成分分析；而七十味珍珠丸由于为保密处方，对于其植物药的研究尚未见公开文献报道。在药理研究上，两者均进行了安全性和脑缺血方面的药理研究，但二十五味珍珠丸整体而言药理研究相对滞后，七十味珍珠丸现代药理学研究较多。在临床上，两者均多用于心脑血管疾病，此外七十味珍珠丸目前还用于治疗小儿抽搐、风湿性关节炎等。

52七十味珍珠丸的量-时-效关系不清楚七十味珍珠丸“每3～7日给药一次”，似“缓释作用”，但缺乏药理学和药剂学数据支撑。在治疗心脑血管疾病中存在有效剂量与时间段跨度均很大等问题，如在治疗缺血性脑卒中的剂量为2～1000mg/（kg·d），平均值为192mg/（kg·d），临床治疗的有效时间段为10～90d，实验研究的有效时间段为3h至7d。在剂量设置和起效时间、维持时间判断方面均可能存在误判或随意的可能，进而影响临床治疗的有效性[49]。故开展七十味珍珠丸的量时效关系研究，可为后续的有效性评价、作用机制和临床研究提供基础。

53七十味珍珠丸中植物药化学成分的分析测试思路及实践通过上述数据对比分析可知，在七十味珍珠丸中，与二十五味珍珠丸共有植物药6种（檀香、沉香、降香、红花、西红花、诃子），并且在其它公开发表的文献中还整理出安息香、沉香、短穗兔耳草、甘草、天竺黄、木诃子、藏荆芥、荆芥等药物组成。通过查阅药典等资料分析这些植物药中含有的化学成分，笔者重点开展了七十味珍珠丸中没食子酸、柯里拉京、沉香四醇等化学成分的HPLC研究和分析。现已定量测试6个成分（详见图1），其中没食子酸含量最高，为1484 mg/g；其次为西红花苷Ⅰ和柯里拉京，含量分别为0654 mg/g和0567 mg/g，鞣花酸、西红花苷Ⅱ及沉香四醇含量相对较低，分别为0399 mg/g、0343 mg/g及0279 mg/g。还定性测试出鹰嘴豆芽素A、胡椒碱、甘草苷，进而为开展血清药物化学和药代动力学研究奠定了基础。

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（收稿日期：2016-12-12编辑：陶希睿）

基金项目：国家自然科学基金资助项目（NO：31400950）；广西自然科学基金（NO：2015GXNSFBA139138、2015GXNSFCA139021、2016GXNSFAA380189）。

作者简介：伍冠一（1980-），男，汉族，博士，助理研究员，副教授，研究方向为中药止痒机制研究。E-mail：w5gy1@126com

通信作者：陈曦（1982-），女，汉族，博士研究生，讲师，研究方向为中药业痒成分析。E-mail：52004111@qqcom