丙酸发酵过程中四种有机酸快速、简便的分析方法
2016-09-19杨海朋王自强王云山张利平苏志国
杨海朋,王自强,王云山*,张利平,苏志国
(1.河北大学生命科学学院,河北保定071002;2.中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190)
丙酸发酵过程中四种有机酸快速、简便的分析方法
杨海朋1,2,王自强2,王云山2*,张利平1,苏志国2
(1.河北大学生命科学学院,河北保定071002;2.中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190)
产酸丙酸杆菌在发酵生产丙酸的同时也会伴随有机杂酸的产生,通过对4种有机酸的监测以期调控发酵条件,从而使丙酸高产。应用HPLC的方法分别研究了在不同流动相种类、pH、洗脱条件、流速、柱温条件下四种有机酸的分离状况,建立了快速、简便测定丙酸、乳酸、乙酸和丁二酸四种有机酸的方法。结果表明,色谱柱条件为COSMOSIL 5C18-PAQ(4.6 mm×250 mm),检测器为紫外检测器,紫外检测波长为210 nm,流动相为K2HPO4缓冲液(0.02 mol/L)和乙腈(0~1%梯度洗脱),流速1.0 m L/min,柱温25℃,进样量10 μL,采用外标法定量。在该条件下各物质线性回归方程相关系数均>0.999,加样回收率均在95%~105%,精密度实验结果相对标准偏差均<5.0%,表明该方法准确度高、精密度好,可为丙酸发酵过程中四种有机酸的监控及发酵调控提供数据参考。
高效液相色谱;丙酸;发酵;有机酸;检测
丙酸又称甲基乙酸,是一种常见的天然有机弱酸,无色透明带刺激气味的液体,有吸湿性,具有爆炸危险[1]。对人畜基本无害,被广泛应用于谷物、饲料和食品的防腐保鲜中[2-3]。同时也可用于制取有机化工原料及中间体α-氯丙酸、2,2-二氯丙酸和α-嗅丙酸等[4]。在医药领域,丙酸可作医药中间体[5]。……
