彭运生，孙顺昌，陈群蓉，谢春英，王 清

（深圳市宝安区人民医院 检验科，广东 深圳518101）

β－珠蛋白生成障碍性贫血又称β－地中海贫血，是由β－珠蛋白基因突变导致β－珠蛋白肽链合成减少或缺乏所产生的贫血［1］。β－珠蛋白生成障碍性贫血主要分布在地中海沿岸和东南亚地区，据统计全球约有1.5亿β－珠蛋白生成障碍性贫血患者［2］。我国长江以南区域的β－珠蛋白生成障碍性贫血的发病率也较高，其中以广东、广西及海南三省的发病率最高［3］。依据贫血程度，β－珠蛋白生成障碍性贫血分为轻型、中间型及重型β－珠蛋白生成障碍性贫血［4］。红细胞参数是反映红细胞大小及血红蛋白含量的参数，它包括红细胞平均容积（mean cell volume，MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（mean cell hemoglobin，MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（mean cell hemoglobin concentration，MCHC）、红细胞体积分布宽度标准差（red blood cell distribution width－standard deviation，RDW－SD）及红细胞体积分布宽度变异系数（red blood cell distribution width－coefficient of variation，RDW－CV）等，这些指数对珠蛋白生成障碍性贫血的诊断有重要意义［5］。轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血是β－珠蛋白基因杂合突变所导致，患者一般无临床症状，通常需实验室检查才能确诊［6］。本研究以轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者为研究对象，探讨β－珠蛋白基因的突变类型与红细胞参数的相关性。

1 资料与方法

1.1 对象 收集深圳地区中国汉族人群118例轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者的外周血标本。男性62名，女性56名，年龄为28.1±12.6岁（8～59岁）。轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血的诊断及分型标准见文献报道［7］。前期突变分析显示所有118例患者均存在β－珠蛋白基因杂合突变，突变类型有7种，其中IVS－II－654（C→T）突变率最高，－28（A→G）突变率最低，其它5种突变依据突变频率的高低分别为 codon17（A→T）、codon41／42（－TTCT）、codon71／72（＋A）、codon27／28（＋C）、codon43（G→T）。本研究同时收集110例中国汉族人群体检健康的个体，男性57例，女性53例，年龄为34.6±14.5岁（21～60岁）。

1.2 方法 用Sysmex XE－2100全自动五分类血液分析仪对患者及健康个体外周静脉血进行分析。MCV、MCH、MCHC、RDW－SD 及 RDW－CV 通 过仪器自动计算获得。依据7种突变类型进行分组，每组患者的各项红细胞参数均与全部患者的相同项参数的均数进行团体t检验。与全部患者参数有显著性差异的患者组再与其它患者组进行团体t检验。

2 结果

118例轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者，共存在7种β－珠蛋白基因突变，均为杂合突变。各组患者和正常对照组的红细胞参数见表1，与正常对照组相比，轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者的MCV、MCH、MCHC 及 RDW－SD均降低（P＜0.01），而RDW－CV则高于正常对照组（P＜0.01）。

依据7种突变类型进行分组，经与全部患者的红细胞参数进行团体t检验，显示携带codon41／42（－TTCT）突变的患者组 MCV、MCH及 MCHC高于其它突变患者组（P＜0.05），而RDW－CV低于其它突变患者组（P＜0.05）。携带codon41／42（－TTCT）突变的患者组RDW－SD与其它突变患者组无显著差异（P＞0.05）。除携带codon41／42（－TTCT）突变的患者组外，携带其它突变的患者组的各项红细胞参数与全部患者相比，各项参数均无显著性差异（P＞0.05）。

表1 各类突变患者的红细胞参数

3 讨论

β－珠蛋白生成障碍性贫血它是由位于第11号染色体上的β－珠蛋白基因突变而导致的β－珠蛋白链合成缺陷所致［8］。轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者可无症状或仅轻度贫血，实验室血红蛋白电泳检查时患者的HbA2一般会轻度升高［9］。目前已发现的β－珠蛋白基因突变有300多种，这些突变在不同地区和人群中存在着不同的突变热点，它们所占的比例也不相同［10］。在中国人群中已发现的β－珠蛋白基因突变约20多种，本研究前期在118例深圳地区中国汉族人群轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者中共发现7种突变，均以杂合状态存在，以突变频率高低依次为IVS－II－654（C→T）、codon17（A→T）、codon41／42（－TTCT）、codon71／72（＋A）、codon27／28（＋C）、codon43（G→T）、－28（A→G）。红细胞参数可反映红细胞大小及血红蛋白含量，对诊断珠蛋白生成障碍性贫血有参考意义［11］。因此本研究以轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者为对象，探讨β－珠蛋白基因的突变类型与红细胞参数的相关性。

依据突变对β－珠蛋白合成的影响，β－珠蛋白基因突变可分为2类，使β－珠蛋白合成完全缺乏的突变称为β0突变，使β－珠蛋白合成减少的突变称为β＋突变［12］。本研究的7种突变中除IVS－II－654（C→T）和－28（A→G）突变为β＋突变外，其余5种β－珠蛋白基因突变均为β0突变（表2）。从表2各种突变效应推测IVS－II－654（C→T）和－28（A→G）突变引起的表型应轻于其余5种β－珠蛋白基因突变。

β－珠蛋白生成障碍性贫血为小细胞性贫血。与正常对照组相比，本研究118例轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者的 MCV、MCH、MCHC及RDWSD均降低，这与β－珠蛋白生成障碍性贫血的特征相符。轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血患者的RDWCV高于正常对照组，显示轻型β－珠蛋白生成障碍性贫血为小细胞不均一性贫血。本研究依据发现的7种突变类型进行分组，各组患者的红细胞参数与全部患者的红细胞参数均数进行比较。结果显示携带codon41／42（－TTCT）突变的患者 MCV、MCH 及MCHC高于其它突变患者，而RDW－CV低于其它突变患者。携带codon41／42（－TTCT）突变患者的RDW－SD与其它突变患者无显著差异。除携带codon41／42（－TTCT）突变的患者外，携带其它突变的患者组的各项红细胞参数与全部患者相比，均无显著性差异。这显示codon41／42（－TTCT）突变引起的表型可能轻于其它几种β－珠蛋白基因突变。β＋与β0突变的区分并不能解释codon41／42（－TTCT）突变引起的红细胞参数差异。这或许与突变引起的β－珠蛋白C－端氨基酸序列改变有关。因此β－珠蛋白生成障碍性贫血的表型不仅与β－珠蛋白合成量的多少有关，也与β－珠蛋白的序列改变有关。

表2 各类突变的性质

［1］Ghedira ES，Dupin－Deguine D，Duffilot D，et al.A second observation of the rare frameshift mutation in theβ－globin gene：codon 46（＋A）（Hbb：c.138＿139insA）［J］.Hemoglobin，2011，35（2）：157.

［2］Waye JS，Nakamura－Garrett LM，Eng B，et al.β＋－Thalassemia trait due to a novel mutation in theβ－globin gene promoter：－26（A＞C）［HBB c.－76A＞C］［J］.Hemoglobin，2011，35（1）：84.

［3］荣卡彬，黄 革，蒋文玲，等.中间型β地中海贫血家系基因分子生物学特征分析［J］.中华检验医学杂志，2009，32（4）：412.

［4］Angalena R，Prabitha KN，Chaudhary AK，et al.A novel homozygous point mutation at codon 82（HBB：c.247A ＞T）in the betaglobin gene leads to thalassemia major［J］.Int J Lab Hematol，2010，32（5）：548.

［5］Shang X，Rao Z，Lou J，et al.Compound heterozygosity for a rare small deletion and a common point mutation in the beta－globin gene：report of two Chinese families［J］.Int J Lab Hematol，2011，33（1）：79.

［6］Yi P，Yu F，Huang S，et al.Identification of a novel frameshift mutation at codon 53（－T）in the beta－globin gene causing dominantly inherited beta－thalassemia in a Chinese Miao family［J］.Blood Cells Mol Dis，2008，41（1）：56.

［7］Chin JY，Kuan JY，Lonkar PS，et al.Correction of a splice－site mutation in the beta－globin gene stimulated by triplex－forming peptide nucleic acids［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2008，105（36）：13514.

［8］Yu N，Kim HR，Cha YJ，et al.A novel frameshift mutation at codon 66 （HBB：c.del201A）in theβ－globin gene leads to betathalassemia［J］.Ann Hematol，2011，90（2）：243.

［9］Cadet E，Foulon K，Claisse JF，et al.First identification of a point mutation at position－83（G＞A）of the beta－globin gene promoter［J］.Hemoglobin，2009，33（3）：274.

［10］Li DZ，Liao C，Xie XM，et al.A novel mutation of－50（G－－＞A）in the direct repeat element of the beta－globin gene identified in a patient with severe beta－thalassemia［J］.Ann Hematol，2009，88（11）：1149.

［11］Dufva M，Poulsen L.Genotyping of mutation in the beta－globin gene using DNA microarrays［J］.Methods Mol Biol，2009，509：47.

［12］Mais DD，Gulbranson RD，Keren DF.The range of hemoglobin A（2）in hemoglobin E heterozygotes as determined by capillary electrophoresis［J］.Am J Clin Pathol，2009，132（1）：34.