靳荣帅，陈 实，周 娟，白少成，张 琛，姚 凡，陈 阳，吴信生

（扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州 225000）

卵巢颗粒细胞存在于雌性动物卵泡腔内，一般颗粒细胞可分为两大类，一类是包裹在卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞，一类是排列在卵泡壁上的壁层颗粒细胞[1]。包裹卵母细胞的卵丘颗粒细胞会在排卵前发生扩散，排卵后壁层颗粒细胞会发生黄体化形成粒黄体细胞，之后与膜细胞形成黄体，这一过程对维持妊娠至关重要。卵泡的发育及排卵依赖于卵巢颗粒细胞和卵母细胞之间的高度协调发育，而这种高度协调发育主要通过2 种细胞之间持续、复杂、双向的信号交流完成[2-3]。卵丘颗粒细胞与卵母细胞之间通过微绒毛形成缝隙连接，2 种细胞通过缝隙连接完成营养物质、初级代谢产物和一些信息分子的传递，进而促进2 种细胞的生长和分化，使两者达到高度协调发育[4-5]。此外，卵母细胞无法有效利用葡萄糖产生能量，只能利用颗粒细胞代谢产生的羧酸进行氧化磷酸化反应产生发育所需的能量[3,6]。也有研究表明卵丘颗粒细胞所产生的丙酮酸可为卵母细胞发育提供重要的支持[7-8]。因此，兔卵巢颗粒细胞对卵母细胞的成熟及卵泡的正常发育都有着至关重要的作用。

在前期研究中，利用含10%胎牛血清的DMEM 培养基进行原代兔卵巢颗粒细胞培养，发现细胞生长增殖速度较慢。为优化兔卵巢颗粒细胞体外培养体系，本实验在体外分离鉴定了兔卵巢颗粒细胞，并优化了培养条件，为卵巢颗粒细胞在体外调节卵母细胞发育和代谢等后续研究奠定基础。……