猪圆环病毒2型感染猪肠上皮细胞对CD4+T细胞分化关键分子mRNA的影响

2021-09-18石凤阳李焕荣

北京农学院学报 2021年3期

石凤阳，李焕荣

(北京农学院动物科学技术学院/动物类国家级实验教学示范中心，北京 102206)

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2，PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)的主要病原，被其感染猪以淋巴细胞凋亡和炎性细胞浸润为主要特点，机体免疫机能受到抑制[1]。其免疫抑制机理一直是PCV2研究的热点。PCV2感染在一定程度上减少了猪外周血CD4+T细胞的数量[2]。表现PMWS的猪肠中存在大量PCV2抗原，肠道出现炎性侵染现象[3]，PCV2能够在猪肠上皮细胞中增殖[4]。已有研究表明PCV2感染能够改变猪肠上皮细胞中炎性相关分子的表达[5-6]，此变化对CD4+T细胞的分化产生何种影响值得探索。

本研究拟通过PCV2感染的猪肠上皮细胞与CD4+T细胞共培养，模拟PCV2感染的猪肠上皮局部环境，研究PCV2感染猪肠上皮细胞对CD4+T细胞分化关键分子mRNA水平的影响，为进一步研究PCV2感染猪肠上皮细胞调控CD4+T细胞分化机制奠定基础。

1 材料和方法

1.1 病毒和细胞

PCV2-SD 2008株(GenBank登录号：GQ174519)由河北农业大学动物传染病实验室分离鉴定并惠赠，105.5TCID50/mL。无PCV1/PCV2污染的PK-15细胞系由中国农业大学惠赠。猪肠上皮细胞系购自广州吉尼欧生命科技有限公司(源自DSMZ，货号No701)。

1.2 试验动物

3头30日龄经PCR或RT-PCR检测的猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪呼吸与繁殖综合征病毒[3,6]均阴性的长白猪，购自北京市SPF猪育种管理中心。试验猪单独饲养于北京农学院动物房，自由采食与饮水，以备采血。该试验已通过北京农学院动物福利与伦理审查，编号为BUA2020092。