IMSA 技术快速检测肠出血大肠杆菌O157:H7 方法的建立及应用
2021-09-14徐文娟石盼盼
王 琪,徐文娟,石盼盼
(1.郑州市食品药品检验所,河南郑州 450000;2.郑州大学基础医学院,河南郑州 450000)
食品安全问题是全世界人们共同关注的公共卫生安全问题。近年来,由微生物引起的食源性疾病在食品安全事故中的比例不断上升,对人类健康和生命安全构成了严重的威胁[1]。肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic E.coli, EHEC)是一种危害严重的人兽共患病原体,主要通过受污染的食物传播,如牛肉、奶制品、蔬菜和水果[2],极易对人们的身体健康造成巨大危害。自1982 年在美国首次被分离出来,并被认为是一种新型的肠道致病菌[3],美国又发生了多起该病的暴发流行[4−5]。我国也受到肠出血性大肠杆菌O157:H7 的感染威胁,江苏、安徽省于1999 年暴发流行肠出血性大肠杆菌O157:H7 感染性腹泻,流行时间7 个月,患者超过2 万例,死亡177 例[6]。肠出血性大肠杆菌引起散发性或暴发性出血性结肠炎的血清型主要为O157:H7,可产生志贺氏毒素样细胞毒素[7],可引起出血性结肠炎、溶血性尿毒症综合征和血小板减少性紫癜等[8],严重者还可能导致死亡。
目前对肠出血性大肠杆菌 O157:H7 的检测通常采用常规增菌培养、自动酶联荧光免疫检测方法(ELISA)、免疫磁珠捕获法、噬菌体分型技术、单重及多重PCR 快速检测法等[9−12]。传统检测方法《GB 4789.36-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM 检验》[13]中的常规培养法和免疫磁珠捕获法应用最为广泛。该方法中常规培养法主要靠不发酵山梨醇、不发酵鼠李糖、不分解MUG(4-甲基伞形花内酯-β--D-葡萄糖醛酸苷)的生化特性进行血清学生化检测试验,但是其做法繁琐,检出效率低,需要培养的时间长,需6~8 d 才能得到检出结果,而且需有有一定的专业技术人员才能动手操作。……
