吴佳南，刘 洋

（黑龙江省佳木斯市中心医院 检验科，黑龙江 佳木斯 154002）

结核性胸膜炎属于肺外结核病，是结核杆菌以及其自溶产物或者代谢产物进入到机体的胸膜腔，所引起的炎症[1]。大部分的结核性胸膜炎属于急性病，主要表现为结核的全身中毒症状或者胸腔积液所致的局部症状。可见，给予结核性胸膜炎患者科学有效的诊断十分必要，对临床治疗提供重要参考。目前临床诊断该病的主要方法仍是通过胸膜活检，这也是疾病诊断的金标准，但是其具有一定弊端，如该种方式是有创操作，具有一定风险，故寻求一种灵敏度较高的替代法成为临床研究重点[2]。酶联免疫斑点检测（enzyme linked immunospot assay，ELISPOT） 具有快速、灵敏等特点，目前被临床广泛应用，但目前对其研究并不多见。鉴于此，本研究旨在探讨ELISPOT诊断结核性胸膜炎的临床价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年8月-2019年8月本院收治的74例疑似为结核性胸膜炎患者为研究对象，其中男40 例，女34 例；年龄21 ～65 岁，平均年龄（42.56±3.65） 岁；体 质 量45 ～69kg，平 均（56.54±2.51） kg。本研究经医学伦理委员会批准。纳入对象：所有患者均符合《肺结核门诊诊疗规范（2012年版）》[3]中诊断标准；患者及家属知情并签署知情同意书。排除标准：合并严重心、肝、肾等重要脏器病变者；合并恶性肿瘤者。所有患者均经经皮穿刺胸膜活检检查。

1.2 方法

⑴标本采集：采集所有患者空腹静脉血4～5mL，通过肝素纳抗凝，分离血清，及时送检；并进行经皮胸腔穿刺，留取新鲜胸腔积液100mL，按照要求送检。⑵试剂及方法：腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA） 检测通过酶法的连续监测法，采用Faith-3000 型的生化仪，采用PBT-X2 型生物芯片阅读仪及试剂，严格按照操作说明书进行检测，结果由芯片阅读仪设定的参数自动判别。阳性判断标准：血清ADA≥25U/L。ELISPOT：采用T-Spot-TB试剂盒，采用ELISPOT计数仪进行斑点阅读分析结果，每个斑点代表一个活性淋巴细胞，当任意一个检测孔达到下面标准则判定为阳性。①空白对照孔斑点数＜5，检测孔的斑点数减空白对照孔≥6；②或空白对照孔≥6，检测孔斑点数＞空白对照孔的2 倍。

1.3 评价指标

统计2 种检查方式的诊断结果，以经皮穿刺胸膜活检为金标准，比较两种检查手段诊断结核性胸膜炎的价值，并分析其与胸膜活检结果的一致性。

1.4 统计学方法

采用SPSS20.0 统计学软件，计数资料以百分数和例数表示，采用χ2检验；一致性采用Kappa检验（Kappa＞0.75 表明一致性极好，0.4～0.75 表明一致性较为理想，＜0.4 表明一致性差），以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 经皮穿刺胸膜活检检查结果

74 例疑似为结核性胸膜炎患者中，经经皮穿刺胸膜活检检查确诊为结核性胸膜炎61 例，占82.43%（61/74）。其中细菌性肺炎23 例，类肺炎性胸腔积液17 例，恶性胸腔积液例15 例，其他6 例。

2.2 ADA，ELISPOT 检查与活检检查结果对比

依据经皮穿刺胸膜活检检查结果，ELISPOT检查出60 例阳性患者，阳性检出率为98.36%；ADA 检查出53 例阳性患者，阳性检出率为86.89%。ELISPOT 诊断的阳性检出率高于ADA 检查，差异有统计学意义（χ2＝4.319，P＝0.015）。ELISPOT 检查与经皮穿刺胸膜活检检查结果具有极好的一致性（Kappa＝0.864），ADA 检查与经皮穿刺胸膜活检检查结果具有理想的一致性（Kappa＝0.549），见表1、2。

表1 ADA 检查与活检检查结果对比（n）

表2 ELISPOT 检查与活检检查结果对比（n）

2.3 ADA，ELISPOT 对结核性胸膜炎的诊断价值

ELISPOT 检查的灵敏度、准确度、阴性预测值均高于ADA 检查，差异有统计学意义（P＜0.05）；且特异度、阳性预测值略高于ADA 检查，但差异不显著（P＞0.05），见表3。

表3 ADA、ELISPOT 对结核性胸膜炎的诊断价值［n（%）］

3 讨论

目前临床诊断结核性胸膜炎的金标准是胸膜活检或者细菌培养，虽然具有较高的诊断准确率，但均有一定弊端，如胸膜活检具有较大创伤，在临床应用中具有一定限制；通过培养结核分枝杆菌，阳性率较低[4]。因此，寻求一种快速且敏感性高的诊断指标对诊断结核性胸膜炎至关重要。

ADA 是一种嘌呤代谢中的重要的多肽酶，其在胸腺、脾等组织中具有较高的活性，且广泛存在于人体全身各组织细胞中，特别是在T 淋巴细胞中具有较高的含量[5]。临床研究结果显示，ADA活性增高与T 淋巴细胞的增殖以及分化具有十分密切的关系。当患者患有结核性胸膜炎时，T 细胞受到抗原的刺激，导致ADA 在胸腔积液中的含量升高，故ADA 可作为诊断结核性胸膜炎诊断的重要辅助方式之一[6]。但其诊断具有一定局限性，如血清中的ADA 具有较低活性，单独使用血清ADA检测诊断结核性胸膜炎灵敏度及特异度较低，并无太大诊断价值。ELISPOT 是一种免疫细胞功能的新型方法，具有灵敏度高、稳定性高等优点，其是通过检测经抗原刺激后分泌细胞因子的效应T淋巴细胞的数量进行诊断，目前已被广泛应用于医学研究中[7]。ELISPOT 具有较强的免疫原性以及免疫反应性，这种保护性效果可以维持在整个疾病过程中，且患者在康复之后，也可持续较长一段时间[8]。本研究结果显示，ELISPOT 诊断的阳性检出率高于ADA 检查，且其诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值均优于ADA 检查；此外，ELISPOT 检查与经皮穿刺胸膜活检检查结果具有极好的一致性，表明ELISPOT方法在结核性胸膜炎诊断中具有更高的诊断价值，可作为诊断该病的重要指标，且与胸膜活检具有极好的一致性，可应用到临床诊断中。有学者表示，ADA 与ELISPOT 联合检测可进一步提高结核性胸膜炎的诊断价值，但该结论仍待证实。

综上所述，ELISPOT 诊断结核性胸膜炎具有较高的敏感性，诊断价值高，与胸膜活检具有极好的一致性，可作为早期诊断结核性胸膜炎的重要手段。