季 珂， 李 恒*， 龚劲松， 耿 燕， 丁振中， 蒋 敏， 许正宏， 史劲松

（1.江南大学 药学院，江苏 无锡 214122；2.扬州日兴生物科技股份有限公司，江苏 高邮 225601；3.江南大学生物工程学院，江苏 无锡 214122）

壳寡糖（chitosan oligosaccharides，COS）是一种海洋来源的相对分子质量小于3 000的低聚糖。目前，壳寡糖大都通过化学法（包括酸解法和氧化法）、物理法[1]以及酶解法（纤维素酶[2]或壳聚糖酶）降解得到。基于壳聚糖酶的专一性与高效性，用其制备壳寡糖的方法具有良好的应用优势和发展潜力[3]。

COS相对分子质量低的特性不但改善了其原料水溶性差的问题，同时其也具有广泛的生物功能，包括抗炎[4]、抗菌[5]、抗氧化[6]、降糖[7]及神经保护等。近年来，针对COS抗肿瘤活性的研究逐渐成为热点。

研究表明，在多株肿瘤细胞（胃癌细胞、肾癌细胞、肺癌细胞、乳腺癌细胞和结肠癌细胞等）中，COS均能达到半数致死的效果[8]。相对分子质量和去乙酰度影响其抗肿瘤活性，且低相对分子质量表现出更为明显的效果[9]。在作用机制探索方面，COS可通过诱导HeLa和A549细胞的自噬性死亡而抑制细胞增殖[10]，对A549细胞，COS还可明显降低细胞线粒体膜电位水平而促进细胞凋亡[11]。此外，COS可通过上调p21，下调PCNA、cyclin A和cdk-2基因抑制HepG2细胞的DNA合成速率，抑制细胞增殖[12]；通过诱导SW480细胞阻滞在G2/M期而抑制细胞增殖[13]。由此可见，COS对不同肿瘤细胞的作用和机制并不完全相同，其对肿瘤细胞的作用还有待进一步研究。

为了进一步了解COS潜在的抗肿瘤作用，首先以壳聚糖酶酶解法自行制备COS，建立基于分级处理的COS优化制备工艺，将获得的低相对分子质量COS产物对不同肿瘤细胞的抗肿瘤活性进行评价初筛，进而在作用最为显著的人乳腺癌MDA-MB-231细胞中进行量效关系评价及初步机制探讨。……