焦海山,宋悦宁,肖 波,黄 健,李东印

(1.苏州卫生职业技术学院基础医学教研室, 江苏苏州 215009; 2.苏州卫生职业技术学院临床医学教研室,江苏苏州 215009)

周围神经损伤在临床上较为常见,按治疗原则应尽早恢复神经的连续性,但由于临床损伤的复杂性,受各种主观、客观条件影响,在急性期未得到及时处理而演变为陈旧性损伤的病例仍较多。 相对于急性神经损伤,陈旧性神经损伤中近端神经元的成活率,远端维持再生神经生长的微环境等条件皆较差,尤其是失神经支配的远侧断端和靶器官的等待时间将比急性损伤直接修复长,导致陈旧性神经损伤修复效果较差[1-4]。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康雌性SPF 级SD 大鼠30 只由中科院上海实验动物中心提供[SCXK(沪)2017-0005],7 周龄,体重160～180 g 左右,随机分为缺损8 周自体神经修复+SLES 组(实验组,n=15),缺损8 周自体神经修复组(对照组,n=15)。 动物实验在苏州大学实验动物中心完成[SYXK(苏)2016-0049]。 动物实验研究由苏州卫生职业技术学院实验动物伦理委员会审查并批准(SWAE202002),动物实验过程遵循3R 原则。

1.2 主要试剂与仪器

小鼠抗生长相关蛋白-43 (growth-associated proteins 43,GAP-43)单抗、兔抗脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)多抗、羊抗小鼠 IgG-FITC 二抗、羊抗兔 IgG-TRITC 二抗、小鼠抗神经丝蛋白(neurofilament, NF)单抗、兔抗可溶性蛋白-100(soluble protein-100, s-100)多抗(以上抗体皆来自武汉博士德生物工程有限公司);荧光金(Fluoro-Gold,FG)逆行示踪剂(Fluorochrome 公司, 美国);TI CFIS60 倒置荧光显微镜(Nikon 公司,日本);JEM1230 透射电镜(JEOL 公司,日本)。

1.3 实验方法

1.3.1 模型制备、修复及一般观察

以含3%的戊巴比妥钠的复合麻醉剂(30 mg/kg)对动物进行……