李国萃,陆佳涵,卢秋翰,杨晨波,丛 喆,魏 强

(北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021)

在许多免疫系统疾病的研究中,T 细胞激活和增殖程度可以反应疾病的进展状况。 通常将PBMC(外周血单个核细胞)作为靶细胞来研究细胞因子的分泌和表面活化标志物及增殖标志物的表达等。常用的 T 细胞刺激剂为 PMA+Ionomycin、α-CD2/α-CD3/α-CD28、PHA-P+IL-2 等。 T 细胞接受活化信号后,检测活化分子的表达是一种常规手段。 CD69分子是自然杀伤细胞受体家族的C 型凝集素,T 淋巴细胞被活化后,CD69 迅速被诱导表达,而且在短时间内很快便能达到高峰,因此CD69 被用作淋巴细胞活化的早期标志物[1-2]。 CD38 分子常作为一种用于诊断临床疾病的指标,同时也是T 细胞晚期活化标记物[3-4]。 HLA-DR 分子是MHC-II 类分子,主要起着抗原呈递的作用,也是T 细胞活化的常用标志物。 Ki67 常作为T 细胞增殖标记。 本研究拟通过流式细胞术检测T 细胞活化分子来比较几种不同T 细胞刺激剂的活化效果,以期为T 细胞激活相关研究选择合适的刺激剂奠定实验基础。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

3 只 SPF 级中国恒河猴,1 只雌性,2 只雄性,年龄为3～6 岁,体重约7 ～8 kg,均购自北京协尔鑫生物资源研究所[SCXK(京) 2015-0011]。 实验前通过免疫荧光法筛查,排除猴疱疹病毒,猴逆转录D型病毒,猴免疫缺陷病毒及猴T 淋巴细胞性I 型病毒。……