郭培玲，马 铭，闫兰芳，陈双艳，赵富锋，陈 蓉

四川省成都市双流区第一人民医院/四川大学华西空港医院医学检验科，四川成都 610200

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，每年约有100万新发胃癌病例，病死率在恶性肿瘤中位居第二[1]。作为典型的实体肿瘤之一，胃癌能够在短期内快速增长导致肿瘤组织内部存在缺血、缺氧区[2]。局部缺氧是胃癌发生发展的重要环节，肿瘤细胞在缺氧环境下形成一系列补偿机制以适应低氧微环境，从而促进肿瘤增长[3-4]。在胃癌适应缺氧的补偿机制中，缺氧诱导因子-α(HIF-α)起主导作用，其中作用最显著的是HIF-1α和HIF-2α[5]。HIF-1α及HIF-2α的阳性表达均能够通过诱导局部缺氧环境的形成，加剧癌细胞核DNA的转录速度，提高癌细胞的浸润和黏附能力[6]。现有的研究主要报道了HIF-2α在如小细胞肺癌[7]、结肠癌[8]、肝癌[9]等癌症中的作用。有关HIF-2α在胃癌中的研究相对较少。因此，本文旨在应用特异性HIF-2α小干扰RNA(siRNA)下调低氧诱导下胃癌细胞BGC823中HIF-2α的表达，探讨HIF-2α对低氧环境下胃癌BGC823细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响，为胃癌分子靶向治疗提供试验基础。

1 材料与方法

1.1材料来源 人胃癌细胞株BGC823购自中国科学院上海生科院细胞资源中心；RPMI1640细胞培养基、胎牛血清及0.25%胰蛋白酶购自美国Gibco公司；HIF-2α siRNA由上海吉玛股份有限公司设计并合成；Lipo 6000转染试剂、Trizol RNA提取试剂盒、CCK-8分析试剂盒和Annexin Ⅴ-FITC/PI双染试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司。

1.2方法

1.2.1细胞低氧培养 胃癌BGC823细胞置于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液(37 ℃培养箱，5%的CO2)培养，胰酶消化传代。……