唐 越，李欣雨，彭钰凌，贺吉春，李秋香，伍怡颖

成都医学院药学院，四川成都 610000

结直肠癌是消化道常见恶性肿瘤，其发病率在癌症中位于前4位[1-3]。结直肠癌早期不容易被发现，患者确诊时已错过手术治疗最佳时间，同时，该病具有较高的复发及转移率[4-5]，因此大多数患者需要接受传统放化疗改善预后[6]。但化学治疗药物的不良反应较多，而天然药物具有多种优势，例如毒性小、靶点多等[7]。

异甘草素(ISL)主要来源于植物甘草，具有增强免疫功能、减轻炎症等作用[8-10]。近来在卵巢癌、宫颈癌等多种肿瘤的相关研究中发现，ISL有较好的抗肿瘤作用[11-12]。但其对结直肠癌的作用及抗癌机制还不清楚。因此，本研究拟从体内外两方面探讨ISL对结直肠癌的抑制作用。

1 材料与方法

1.1材料 人结直肠癌细胞株HCT-116、SW480和小鼠结直肠癌细胞株CT26购自中国科学院上海生物科学研究所细胞库；ISL购自美伦生物科技有限公司；溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)购自碧云天生物有限公司；Annexin Ⅴ-FITC/PI凋亡检测试剂盒和细胞周期检测试剂盒购自凯基生物技术发展有限公司。

1.2方法

1.2.1MTT法测定ISL对HCT-116、SW480细胞体外增殖的影响 将HCT-116、SW480细胞以1×104个/孔铺于96孔板。待贴壁后，HCT-116细胞分别加入梯度浓度的ISL(10、20、40、60、80、100 μmol/L)，同样SW480细胞中也加入梯度浓度的ISL(20、60、100、140、180、220 μmol/L)，对照组细胞不经药物处理。24 h后，每孔分别加入10 μL MTT，4 h后，加二甲基亚砜(DMSO)，于酶标仪490 nm波长处检测光密度值。

1.2.2流式细胞术检测ISL对HCT-116、SW480细胞凋亡的影响 将HCT-116、SW480细胞以2×105个/孔铺于6孔板。待贴壁后，加入不同浓度的ISL处理24 h，按说明书收集细胞，加入Annexin Ⅴ-FITC和碘化丙啶(PI)染色，于流式细胞仪检测。……