朱洁茹，欧建平△，李 涛，朱伟杰

（1中山大学附属第三医院生殖医学中心，广东广州 510630；2暨南大学生命科学技术学院，广东广州 510632）

当卵泡的窦腔形成后，颗粒细胞分化成两种细胞亚群，分别为围绕卵泡壁的壁层颗粒细胞（mural granulosa cells，MGCs）和附着于卵母细胞的卵丘细胞（cumuluscells，CCs）［1］。MGCs 含有多种激素受体，以自分泌和旁分泌的形式调控卵泡发育、成熟与甾体激素合成［2］，常用作研究卵巢功能的细胞体外模型。目前人MGCs 主要从取卵术废弃的卵泡液中获取［3］，来源易得，但从卵泡液中分离MGCs 需要多次离心等处理，且卵泡液中的MGCs混杂较多红细胞和其它杂质，干扰因素多。因此，应充分阐明MGCs的细胞体外状态，建立合适卵巢功能研究的细胞模型。

CCs是围绕着卵母细胞生长的颗粒细胞层，与卵母细胞形成一个相辅相成的“合胞体”，为卵母细胞提供营养，调节减数分裂的恢复，影响精卵结合和早期胚胎发育［4］。在取卵术中，卵丘卵母细胞复合物被抽吸出来，随后按体外受精（in vitro fertilization，IVF）或单精子卵胞浆内注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）的需要，一部分CCs 被切割而丢弃。这部分CCs 的获取过程简单，且没有过多的其它杂质，红细胞污染少，从理论上而言，CCs是研究卵巢功能的合适细胞体外模型。但对CCs 细胞模型的实验方法学，以及与MGCs 细胞模型的比较仍需充分评价。

自噬和凋亡是细胞在应对环境变化时的两种方式［5-6］，可以反映细胞的活性状态。本项工作比较人MGCs 与CCs 体外分离及原代培养的效果，并检测自噬和凋亡相关基因的表达来分析分离后的细胞特性，以期为深入认识MGCs 与CCs 的细胞体外状态、建立卵巢功能研究的细胞模型提供参考资料。……