许雄锋 钟丽园

【摘 要】目的：本文旨在探讨FN1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：运用免疫组化技术检测胃癌组织及癌旁正常组织中FN1的表达水平并分析其与患者临床参数的关系。结果：在68例胃癌组织中FN1阳性表达率为73.53%（50/68例），癌旁正常组织中FN1阳性表达率为35.29%（24/68例），差异有统计学意义（P<0.05）;在胃癌组织中，FN1的表达水平在胃癌患者的TNM分期与淋巴结转移呈正相关（P<0.05），与患者年龄、肿瘤大小、病理分级无统计学意义（P>0.05）。结论：FN1在胃癌组织中表达上调，其可能是胃癌患者病情进展预测的潜在生物学标志。

【关键词】：FN1;胃癌;临床意义

【中图分类号】R735.2【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2020）07-21--01

胃癌是第四大最常见的癌症，是癌症死亡的第三大主要原因，已经成为世界范围内重要的健康问题，尤其是在中国，韩国和日本。根据国际癌症研究机构的数据，2012年约诊断出950，000例胃癌新病例，和70万例死亡病例[1]。通常，该疾病被诊断已为晚期，并且大多数患者中可用的治疗方法有限。目前，尽管外科手术结合放疗，化学疗法和靶向治疗可以延长患者生存期，但晚期胃癌患者的5年总生存率仍然很差。因此，迫切需要开发新的诊断方法和新疗法以降低与胃癌相关的死亡率并改善患者的临床疗效。

纤维连接蛋白（FN）是一种高分子量的糖蛋白，分子量介于220，000和250，000之间。作为一种粘附分子，FN最初是从人血浆和成纤维细胞的细胞表面分离出来的，并以高水平存在于细胞外基质中，包括存在于胶质瘤在内的多种肿瘤中。纤维连接蛋白1（FN1）是FN家族的成员，它参与多种细胞生物学过程，包括细胞粘附，迁移，生长和分化在内的多个细胞过程中起着至关重要的作用。研究还发现FN1与多种疾病的发生相关，如癌症，关节炎和动脉粥样硬化等。研究已证实FN1在食道鳞状细胞癌，口腔鳞状细胞癌，鼻咽癌，结直肠癌，卵巢癌，肾癌和甲状腺癌中促进细胞增殖和迁移[2]。然而，关于FN1在胃癌中的研究尚少，且意见不一。因此有必要进一步验证和阐明FN1在胃癌中的作用。

1 材料与方法

1.1 一般资料选择2016年4月至2018年10月在我院住院患者手术切除的胃癌标本68例，所有病例术前均未采取放疗、化疗治疗，同一患者手术标本通过切缘正常组织作为正常对照组织。其中，≥60岁的患者42例，<60岁的患者26例;男性患者46例，女性患者22例;高、中分化患者28例，低分化或未分化患者40例;TNM分期I-II期患者30例，III-IV期患者38例;有淋巴结转移者50例，无淋巴结转移者18例。上述组织标本的使用经本院伦理委员会同意。

1.2 试剂免疫组化试剂盒（武汉博士德），DAB显色试剂盒（北京中杉金桥），FN1抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司，二抗购自上海长岛生物技术有限公司。

1.3 方法免疫组化采用SP 法。一抗为兔抗人FN1（稀释倍数为1∶1000），稀释后滴加于切片上，湿盒4 ℃过夜。第2天以羊抗兔二抗室温下孵育半个小时，操作严格按说明书进行。使用DAB显色液室温孵育10min，再用苏木精复染，脱水，封片。

1.4 结果判定：FN1染色阳性产物呈棕黄色颗粒状，均定位于胞质中，根据光学显微镜下观察阳性染色细胞数占瘤细胞总数比例以及染色程度分为：①阴性，阳性细胞数小于10%;②阳性染色，阳性细胞数在10%～50%之间;③强阳性染色，阳性细胞数大于等于50%。

1.5 统计学处理

应用SPSS16.0统计软件进行分析，计数资料的比较采用χ2检验分析，当P<0.05时，为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 FN1在胃癌与正常胃组织中的表达

在68例胃癌组织中，其中50例FN1呈阳性表达（图1），阳性率为73.53%;相应的癌旁正常胃组织中FN1阳性表达仅24例，阳性率为35.29%，之间差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2 胃癌组织中FN1表达与临床参数的关系

在68例胃癌组织中，FN1的表达在TNM分期I-II期患者中明显低于III-IV期患者的表达，差异有统计学意义（P=0.005）;在有淋巴结转移的组织中FN1的表达明显高于无淋巴结转移的组织中表达，差异有统计学意义（P=0.001）;而FN1的表达与患者年龄、性别和病理分级无统计学意义 （P > 0.05）（见表1）。

3 讨论

FN1介导细胞与细胞外基质之间的相互作用，并在细胞粘附，迁移，生长和分化中起重要作用。FN1是整联蛋白受体家族众多成员的配体，参与各种肿瘤的发生和发展。有研究表明，乳腺癌中与肿瘤相关的FNs的表达明显高于正常组织相关的FNs [3]。并且研究显示，在抗癌药物治疗之前神经胶质瘤细胞中FN呈高表达状态，因此，当FN功能成为治疗目标时，这种丰富程度的提高可能有助于肿瘤靶向效率[4]。FN是一种普遍存在的细胞外基质糖蛋白，在整个人的一生中都被组装到所有组织的原纤维基质中。胶质瘤微环境中大量的细胞外基质对胶质瘤形态的维持至关重要，并且与胶质瘤细胞的增殖和分化有关。有报告表明，PI3K / AKT / mTOR途径在FN转录和选择性剪接中起重要作用，从而调节细胞行为[5]。

研究表明，FN1参与多种肿瘤的发生和发展，并在多种癌症中表达上调，例如食道鳞状细胞癌，结肠直肠癌，口腔鳞状细胞癌和甲状腺癌。例如，FN1在口腔鳞状细胞癌中与淋巴结转移密切相关，FN1通过FAK激活增加血管内皮生长因子C，淋巴管生成，并促进EMT的发生。据报道，FN1过表达是头颈癌预后不良的指标。FN1是头颈部鳞状细胞癌对放疗耐药性的潜在生物标志物，FN1在具有顺铂耐药性的卵巢癌中差异表达[6]。目前已有研究确定癌症进展的分子机制涉及FN诱导的基因表达变化。例如，FN1可以增强基质金属蛋白酶（MMPs）的表达，这是促进癌症侵袭和转移的关键因素。在结直肠癌中，FN1可以下调P53并抑制细胞凋亡[7]。FN1在鼻咽癌中也被认为是预后因子。据报道，鼻咽癌中的FN1过度表达与疾病晚期和生存期短有关[8]。

在本次研究中通过免疫组化实验发现，在68例胃癌患者组织中FN1以高表达为主。我们还观察到，FN1在胃癌中的高表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小以及病理分级无关，但却与胃癌患者的TNM分期和淋巴结转移的临床病理特征密切相关。提示FN1的高表达可能与胃癌的发生、发展有关，与文献的报道基本相一致。综上所述，FN1表达水平在胃癌分期中发挥了重要作用，其可能与胃癌病情进展密切相关，FN1可作为预测胃癌病情进展的一个潜在分子标志物，同时也为胃癌的治疗及预后提供新的理论依据。

参考文献

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[2] 张冠妮，杨友松. 细胞纤维连接蛋白生物学特性及研究现状[J]. 实用医院临床杂志，2007（06）：104-105.

[3] 陈皓，黄秋霞，韦康来，冯振博. FN1在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系[J]. 广西医科大学学报，2015，32（02）：241-244.

[4] 张国荣，温树正，景尚斐，韩旭，张金才，郭文，王永飞，韩超前. 纤维连接蛋白（FN）在周围神经再生修复中的研究进展[J]. 世界最新医學信息文摘，2018，18（01）：37-38.

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[7] 孙阳，赵春临. 纤维连接蛋白1在胃癌中的表达及临床意义[J]. 医学研究生学报，2019，32（06）：629-633.

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