姜黄素对关节炎大鼠T细胞的影响

2020-06-28黎德育朱辉军廖康汉罗晓光张洁瑶贺守第

南昌大学学报(医学版) 2020年1期

关键词：模型

黎德育，谭宁，朱辉军，廖康汉，罗晓光，张洁瑶，贺守第

(华中科技大学协和医院中医风湿科，广东深圳 518060)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性自身免疫性炎症疾病，约占世界人口的0.24%，约占西方国家总人口的1%，女性发生率是男性的2～3倍[1-3]。RA表现为慢性滑膜炎和关节进行性破坏，白细胞浸润，软骨破坏和骨侵蚀。大约有一半的患者由于这种疾病的进展而致残[4]。RA是一种主要由CD4+T细胞过度表达导致炎细胞因子表达，引起关节破坏。使用胶原(牛或鸡Ⅱ型胶原和佐剂免疫)诱导关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)是常用模型[5]，能模拟CD4+T细胞介导的炎症与广泛的软骨和骨损害，导致关节畸形[6-7]。姜黄素是从姜黄植物中提取的多酚，其具有抗炎和抗菌，改善自身免疫性疾病症状的作用[8-10]。但姜黄素对T细胞的影响目前研究很少，因此本研究的目的是探讨姜黄素对T辅助细胞亚群Th1、Th2、Th17的影响，以及其对免疫性关节炎的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

雌性SPF级SD大鼠40只，购自广东省实验动物中心。饲养环境温度(22±2)℃，湿度50%～70%，标准大鼠饲料喂养。

1.1.2 主要试剂

姜黄素(美国sigma公司)；牛Ⅱ型胶原(美国Sigma公司)；完全弗氏佐剂(美国sigma公司)；不完全弗氏佐剂(美国sigma公司)；Anti-Rat CD4 APC、anti-rat-IL-4-PE、anti-rat-IFN-r-FITC、Anti-Mouse/Rat IL-17A PE、Cell Stimulation Cocktail、Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer、Flow Cytometry Staining Buffer(美国ebiosience公司)；抗大鼠IL-17A、IFN-γ、IL-4血清ELISA试剂盒(美国ebioscience公司)，CCK8试剂(中国碧云天公司)。

1.1.3 仪器与设备

流式细胞仪RACSCAlibur(美国BD biosciences公司)；全波长酶标仪Multiskar(美国Thermo公司)；二氧化碳细胞培养箱INC108(德国memmert公司)。