牛雅琪

摘要：目的：分析全血标本孵育时间及温度对糖化血红蛋白检测结果的影响。方法：采集2017年12月1月～5日，体检中心检进行血糖检测的50例对象，采集肘部静脉血15ml全血，均分为250份样本，分别孵育3、4、5、7、8min，孵育后放置室温0、2、4、8、16℃，每个时间点以及温度点各10份样本。结果：不同全血样本的孵育温度、时间存在显著差异（P<0.05），孵育5min、7min，2℃～8℃下处理糖化血红蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）。在5min以下，随着温度的上升、时间的延长，糖化血红蛋白水平呈上升趋势，在5min以上，随着温度上升、时间延长，糖化血红蛋白水平呈下降趋势。结论：严格按照说明书操作，孵育时间过长、温度过高都可能导致检验结果假阳性，温度过低、时间过短或导致假阴性，孵育5min、2～8℃条件最为理想。

关键词：糖化血红蛋白;孵育;温度;质量控制

【中图分类号】R457             【文献标识码】A             【文章编号】2107-2306（2021）11--01

糖化血红蛋白是糖尿病诊断、管理质量评价的重要指标，但仍然一项检验结果发挥其临床价值的基础是检验结果准确，能够真实的反映患者指标水平]。 目前糖化血红蛋白的检测方法以仪器检测为主，以罗氏全自动生化分析仪为典型达代表，在上样前需要对全血标本进行孵育处理，孵育时间、温度对检测结果存在显著的影响。本文尝试采用对比分析，分析不同孵育时间、温度对糖化血红蛋白指标的因。

1资料及方法

1.1 一般资料

采集2017年12月1月～5日，体检中心检进行血糖检测的对象，采集肘部静脉血15ml全血，合计50例，其中男25例、女25例，年龄（34.1±6.2）岁。纳入标准：①年龄18～55岁;②采样前严格的质控，无溶血。

1.2  方法

实验室满足美国国家糖化血红蛋白标准化计划认定的Ⅱ级定植实验室要求：测定结果与定值偏倚95%的可信区间误差在（-0.75%，0.75）区间内。样本均严格按照标准处理，4℃保存，1周内使用，避免置于高温环境下。严格的样本采集管理，采血前不受饮食、采血间期的影响，采用乙二胺四乙酸抗凝剂采血管采集。将采集到无脂血、EDTA-2K抗凝、无黄疸与溶血的新鲜全血样本15ml，每个患者的全血都平均分装到250份样本，每个样本加入500μl密封小管中，样本方法时装入到冰袋中，维持样本冷藏状态。进行分组：分别孵育3、4、5、7、8min，孵育后放置室温0、2、4、8、16℃，每个时间点以及温度点各10份样本，合计250份样本。

1.3  观察指标

各个时间段、温度段的样本的检验结果。

1.4  统计学处理

采用SPSS20.0软件进行数学分析，糖化血红蛋白水平服从正态分布采用（Mean±D）（）表示，比较采用t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2  结果

不同全血样本的孵育温度、时间存在显著差异（P<0.05），孵育5min、7min，2℃～8℃下处理糖化血红蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）。在5min以下，随着温度的上升、时间的延长，糖化血红蛋白水平呈上升趋势，在5min以上，随着温度上升、时间延长，糖化血红蛋白水平呈下降趋势。见表1。

3  讨论

本次研究显示，不同全血样本的孵育温度、时间存在显著差异（P<0.05），在5min以下，随着温度的上升、时间的延长，糖化血红蛋白水平呈上升趋势，在5min以上，随着温度上升、时间延长，糖化血红蛋白水平呈下降趋势。这可能与温度上升以及时间的延长患者的红细胞存活时间缩短有关。在8℃以上，患者全血生物活动明显增强，在脱离人体后，更容易出现红细胞死亡，随着时间的延长，患者红细胞的寿命明显缩短，从而导致糖化血红蛋白水平明显下降。而孵育时间过短，则泡沫过多，则也容易导致假阴性。在0℃，温度过低，达到接近冰点，则也干扰的孵育的效果，导致孵育不充分，从而导致上机后反应不充分，导致检验不充分。

最佳的孵育条件是5min、2～8℃最为理想，需要注意的是，不同仪器设备所使用的检验技术存在明显的差异，孵育的最佳设计条件也存在差异。在实践过程中，常出现放置时间过长、温度过高情况，则实际检验过程中，常出现检验结果低于实际结果情况。这不利于2型糖尿病的及早诊断，也可能导致2型糖尿病假性控制。除孵育外，糖化血红蛋白检测质量还受到其他许多影响因素影响，如样本质量、血液的质量、仪器设备的精密度等，有报道显示失血性贫血会导致假性上升，缺铁性贫血会导致糖化血红蛋白水平假性下降。而糖化血红蛋白的检测质控并不仅仅是针对一个环节，需要加强全环节的质控。针对实验室的质量，需要加强环境温度的管理，必要时设计合适的孵育设备，实现孵育的时间、温度的自动化控制。

我國糖化血红蛋白测定标准化工作仍然处于起步阶段，仪器缺乏标准化，不同机构的检验质控水平参差不齐，今后各级卫生机构需要加强自我的质量控制。国家卫生职能机构需要努力制定糖化血红蛋白质控标准，针对不同的仪器设备、卫生机构的质控能力，制定不同级别机构的糖化血红蛋白的质控技术规范。

小结：严格按照说明书操作，孵育时间过长、温度过高都可能导致检验结果假阳性，温度过低、时间过短或导致假阴性，孵育5min、2～8℃条件最为理想。

参考文献：

[1]郭喜，廖远泉，沈继龙.糖化血红蛋白实验室检测技术及方法学进展[J].临床输血与检验，2017，19（06）：646-650.

[2]王冬环.糖化血红蛋白检测标准化与中国现状[J].中国实用内科杂志，2016，36（10）：841-844.