韩启福,刁晓艳,聂静,李子安，彭海，阿祥仁(青海省人民医院医学检验科，西宁 810007)

Sysmex UC-3500全自动尿液分析仪(简称UC-3500)以其操作简便、检测项目较多、检测速度快、数据管理系统化的特点在各类中小型医疗机构普遍应用。目前该仪器的检测项目只有比重项目有标准液，其他半定量检测项目缺乏标准液或标准品，其检测项目准确性难以验证。本文用贝克曼AU5831全自动生化分析仪(简称AU5831)来验证UC-3500部分检测项目的准确性。

1 资料和方法

1.1一般资料 选择2019年1月本实验室患者血清标本30份(直接胆红素≥17.0 μmol/L)，尿液检验样本289份，其中84份用于基质尿液制作(选取常规体检中尿干化学检测各项目均为阴性，比重、pH值均在参考范围内的尿液)，余205份尿液样本用于一致性分析。

1.2仪器与试剂 UC-3500尿液分析仪及其配套MEDITAPE UC-11A试纸(批号AC8006)、质控品(批号UCC01902)(日本Sysmex公司)；AU5831生化分析仪、直接胆红素检测试剂(批号：AUZ6782)、清蛋白检测试剂(批号：AUZ6531)、葡萄糖(Glu)检测试剂(批号：AUZ6146)、生化多项质控品CONTROL SERUM 1(批号：1041C)和CONTROL SERUM 2(批号：1042C)、生化多项校准品(批号：1121D)(美国贝克曼公司)；重组人血清蛋白(杭州纽龙公司)；葡萄糖粉(中国大冢制药公司) 。

1.3方法

1.3.1质量控制 UC-3500及AU5831均在计量检定周期内完成校准，且校准结果符合相关规定的要求，UC-3500每日检测标本前室内质控结果均在控(在说明书标注的质控限范围内)，AU5831室内质控累积变异系数(CV)均在实验室目标CV范围内(直接胆红素：1.46%、清蛋白：1.31%、葡萄糖：1.23%)，参加青海省临床检验中心和国家卫健委临床检验中心室间质评的结果均为100%。

1.3.2参考标准液配制 按照MEDITAPE UC-11A说明书中测定结果判定表中标示浓度范围，将重组人清蛋白和葡萄糖用蒸馏水配制成接近说明书中检测上限的浓度。挑选在AU5831上已经检测过的直接胆红素高值血清样本，结果接近说明书中测定范围表中检测上限。将上述样本按说明书等量级的半定量值用基质尿液按比例稀释，每个梯度至少稀释成10 mL，稀释后不同浓度梯度的样本在AU5831检测，每个梯度检测3次，测得结果在尿液分析仪等量级的半定量值附近时则为标准参考液制作完成，3次结果的均值为标准液参考值。Glu、蛋白质(Pro)、胆红素(直接胆红素)3个项目标准参考液浓度及对应量级见表1。

表1 葡萄糖(Glu)、蛋白质(Pro)、胆红素(直接胆红素)项目标准参考液浓度及对应量级(示值)

1.3.3准确度和符合率验证 将不同浓度梯度的标准参考液在UC-3500上各检测20次，统计后分析评价符合率和准确度。准确度判断标准：检测结果与相应参考浓度的标示值相差同向不超过一个量级，不得出现反向相差；且阳性参考溶液不得出现阴性结果，阴性参考溶液不得出现阳性结果为符合标准。符合率判断标准：按MEDITAPE UC-11A说明书中要求，检测结果的符合率不低于90%。

1.3.4一致性分析 随机收集我院住院患者205份尿液样本在UC-3500上检测完成后，1 h内在AU5831上检测直接胆红素、葡萄糖、清蛋白3项，收集数据后按照MEDITAPE UC-11A说明书，对AU5831检测的结果进行半定量人为分级(见表2)，统计分析2种方法检测结果的一致性。

表2 2种方法检测胆红素(直接胆红素)、葡萄糖、蛋白质(清蛋白)结果的分级方式

1.4统计学分析 用SPSS 22.0软件进行。计数资料以n表示，采用一致性检验(Kappa检验)比较2种方法检测结果的一致性；Kappa结果判读：Kappa计算结果为-1～1，但通常Kappa值为0～1，可分为5组来表示不同级别的一致性：0.0～0.20为极低的一致性，0.21～0.40为一般的一致性，0.41～0.60为中等的一致性，0.61～0.80为高度的一致性，0.81～1几乎完全一致。

2 结果

2.1符合率和准确度 2种方法检测胆红素(直接胆红素)、葡萄糖、蛋白质(清蛋白)3个项目的总符合率分别为96.6%、99%、94%，准确度符合MEDITAPE UC-11A说明书的要求(≥90%)，见表3。

表3 各项目标准参考液浓度符合率和准确度

2.2一致性分析 对205份尿液样本用2种方法检测胆红素(直接胆红素)、葡萄糖(Glu)、蛋白质(清蛋白)3个项目，其Kappa值分别为0.788、0.843、0.741，说明这3个项目在UC-3500的半定量结果与AU5831的定量结果之间有较高的一致性。

3 讨论

按CLSI GP16-A3文件叙述，尿液干化学分析试带结果有疑问时，应做确证试验，建议采用相同或更高灵敏度或特异度的相同或不同方法来检测同一物质，但采用相同尿干化学试带重复检测不能作为确证试验[1]。中国临床检验标准化委员会推荐的参考方法：尿蛋白、葡萄糖和胆红素项目是室内质控和室间质评结果合格的生化分析仪检测结果。UC-3500尿液分析仪在国内已有多家实验室使用，在仪器及配套试纸条的厂家说明书中并无各项目确证物质的说明，除比重外其他检测项目亦无相关确证产品。本文参照中国临床检验标准化委员会推荐的参考方法对尿蛋白、葡萄糖和胆红素3个项目进行准确性验证，被验证的项目各等量级符合率均≥90%，准确性验证结果均符合试剂说明书的要求。2种方法尿液中蛋白质、胆红素、葡萄糖、蛋白质均有较高的一致性，3个项目的Kappa值分别为0.788、0.843、0.741。ISO 15189医学实验室认可相关条款中要求对尿液分析仪进行性能验证。在日常工作中为确保检验结果的准确性应该进行准确度验证或方法学比较，也可以和其他检测系统(或方法)进行一致性分析[2-3]。

综上所述，UC-3500尿液分析仪和AU5831生化分析仪2种方法尿液中蛋白质、胆红素、葡萄糖检测结果均有较高的一致性，在日常工作中需要对尿液干化学分析仪进行准确度验证时，可用溯源性较好的生化检测系统制备相应的标准参考液作准确度验证，可作为无标准参考液时替代方案。目前国内外并未针对尿干化学分析出台统一的性能验证标准或者指南，关于检测项目准确性的验证方法仍需探讨。