侯志斌 刘春艳 郭新建

【摘 要】：目的探究沉默信息调节蛋白2（SIRT2）在结直肠癌肝转移患者中的表达及临床意义。方法选取我院2018年6月～2019年6月收治的结直肠癌肝转移患者56例（肝转移组织、肿瘤原发组织、正常黏膜组织），采用免疫组织化学法检测上述标本内SIRT2表达，并分析结直肠癌肝转移患者不同部位标本中SIRT2表达水平、预后关系、细胞侵袭能力。结果SIRT2在正常黏膜组织中阳性率50.00%高于肝转移组织、肿瘤原发组织14.29%、3.57%（P<0.05）;结直肠癌肝转移患者中SIRT2低表达者生存时间短于SIRT2高表达者（P<0.05）;过表达SIRT2后结直肠癌细胞SW480侵袭能力显著减弱。结论SIRT2在结直肠癌肝转移患者中呈低表达，影响结直肠癌细胞浸润能力，对评估结直肠癌肝转移患者预后具有一定临床价值。

【关键词】：沉默信息调节蛋白2;结直肠癌;肝转移;肿瘤原发组织

结直肠癌是临床常见消化道恶性肿瘤，多发于中年以上人群，40～70岁人群最为多见，目前其发病率、病死率在消化道系统恶性肿瘤中仅次于食管癌、胃癌及原发性肝癌，可经血液循环、淋巴循环及直接蔓延等途径转移至其他组织与脏器[1]。据统计，晚期结直肠癌患者5年生存率仅19.0%，且多数死于肝转移[2]。目前，结直肠癌发病及出现肝转移的分子机制尚不明确，因此寻找新靶点为诊疗提供新思路至关重要。基于此，本研究选取结直肠癌肝转移患者56例，旨在探究SIRT2的表达及临床意义，具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。经医院医学伦理委员会审批，选取三家医院2018年6月～2019年6月收治的结直肠癌肝转移患者56例，男31例，女25例;年龄42～85岁，平均年龄（61.58±8.54）岁;临床分期：Ⅰ期16例、Ⅱ期18例、Ⅲ期12例，Ⅳ期10例;肿瘤分化程度：高分化14例，中分化22例，低分化20例;浸润深度：T2 12例，T3 35例，T4 9例;淋巴结转移：N0 18例，N1 23例，N2 15例。

1.2 选例标准

1.2.1 纳入标准：经病理检查，结合X射线钡剂灌肠、纤维结肠镜检查确诊为结直肠癌，伴发肝转移;签订研究同意书。

1.2.2 排除标准：其他恶性肿瘤者;近期接受相关治疗者;其他消化系统病变者。

1.3 方法

1.3.1 免疫组织化学染色：采集肝转移组织、肿瘤原发组织、癌旁正常黏膜组织，常规石蜡包埋，制备石蜡切片（厚度4μm），二甲苯脱蜡、洗涤及孵育等操作解除内源性过氧化物酶活性，抗原修复及抗原封闭后，4℃一抗孵育及二抗孵育，行辣根过氧化物酶标记，DAB显色;苏木精染核，并脱水透明处理，中性树胶封片，光学显微镜下观察。

1.3.2 免疫组织化学染色半定量评价：阳性表达：细胞质或细胞核内产生明显棕黄色颗粒，根据视野中着色细胞百分比评估染色程度：染色细胞占5%为0分，染色细胞占6%～25%为1分，染色细胞占26%～50%为2分，染色细胞占51%～75%为3分，染色细胞占76%～100%为4分;最终得分=细胞质阳性细胞所占百分比得分+细胞核阳性细胞所占百分比得分;评估标准：阴性：0分;弱阳性：1～4分;阳性：5～8分，其中阴性、弱阳性为阴性病例，阳性为阳性病例;由2名病理医师在不知临床数据情况下对染色情况进行独立评分。

1.4 观察指标。（1）结直肠癌肝转移患者不同部位标本中SIRT2表达;（2）SIRT2阳性表达与预后关系;（3）SIRT2表达与结直肠癌细胞侵袭能力关系。

1.5 统计学方法。SPSS24.0处理，计量资料（）表示，t检验，计数资料n（%）表示，χ2检验，检验标准α=0.05。

2 结果

2.1 结直肠癌肝转移患者不同部位标本中SIRT2表达。SIRT2在正常黏膜组织中阳性率50.00%高于肝转移组织、肿瘤原发组织14.29%、3.57%（P<0.05），见表1。

2.2 SIRT2阳性表达与预后关系。56例患者中失访2例;54例结直肠癌肝转移患者中SIRT2低表达者23例，SIRT2高表达者31例，SIRT2低表达者生存时间（41.47±5.12）个月短于SIRT2高表达者（61.87±6.24）个月（t=12.797，P<0.001）。

2.3 SIRT2表达与结直肠癌细胞侵袭能力关系。结直肠癌细胞SW480转染SIRT2蛋白质粒后过表达SIRT2，通过Transwell侵袭试验，结果发现过表达SIRT2后，细胞SW480侵袭能力减弱;过表达SIRT2后SW480细胞内的mRNA（1.45±0.07）mmol/L高于试验前（0.98±0.05）mmol/L（t=40.886，P<0.001）。

3 讨论

结直肠癌是胃肠道中常见恶性肿瘤，其形成涉及抑癌基因失活与癌基因激活的多基因调节复杂过程，而遗传、慢性肠道疾病、环境等因素与其发病机制密切相关。目前，手术是治疗结直肠癌主要方式，但70%以上患者确诊时已发展至中晚期，错失手术时机。因此，研究早期诊断及评估预后方法，寻找新型治疗靶点，实现结直肠癌肝转移分子靶向治疗已成为研究热点。

本研究发现，SIRT2在正常黏膜组织中阳性率高于肝转移组织、肿瘤原发组织，且SIRT2低表达者生存时间短于SIRT2高表达者（P<0.05），表明SIRT2低表达或缺失可能是结直肠癌患者进展、转移的重要促进因素，可作为诊断结直肠癌肝转移与评估预后指標之一。SIRT2在肿瘤侵袭中充当重要角色，相关研究发现，SIRT2能和B-catenin产生相互作用，进而抑制Wnt信号通路，且SIRT2缺失的小鼠胚胎成纤维细胞及SW480细胞迁移与侵袭能力明显增强。本研究发现，过表达SIRT2后结直肠癌细胞SW480侵袭能力显著减弱，表明SIRT2可通过上调B-catenin，下调MMP2表达，抑制SW480细胞侵袭，进一步证实SIRT2可能与结直肠癌肝转移密切相关。

综上所述，SIRT2在结直肠癌肝转移患者中呈低表达，影响结直肠癌细胞浸润能力，对评估结直肠癌肝转移患者预后具有一定临床价值。

参考文献

谭学贤，杨嶽鑫，罗秋萍，等.四种错配修复基因蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义[J].现代生物医学进展，2017，17（23）：4514-4517.

王搏，申占龙，叶颖江，等.结直肠癌肝转移组织中SIRT2蛋白的表达及其临床意义[J].中华普通外科杂志，2019，34（1）：49-52.