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(1.淮海工学院海洋生命与水产学院,江苏连云港 222005) (2.江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港 222005)

蛋白酶是目前工业化应用最成功的酶类,占据了酶制剂市场的65%以上[1]。蛋白酶在水相催化中可以将蛋白分解为蛋白胨、多肽及游离氨基酸[2]。在有高浓度有机溶剂的体系中,酶催化反应会快速向氨基酸脱水缩合形成肽键方向进行,选择性地催化肽键与酯键的形成,可以被应用于一些重要中间体的合成及手性药物的拆分[3]。但大多数蛋白酶在高浓度的有机溶剂中稳定性差,而通过生物催化工程对酶进行化学修饰、酶固定化等改造又有成本高、操作复杂,且常常以降低酶活为代价的缺点[4-5],这极大地限制了蛋白酶有机相催化的产业化应用。

耐有机溶剂蛋白酶是一类新颖的极端酶,它们在有机溶剂中具有稳定的天然特性,是非水酶学发展的新资源。耐有机溶剂蛋白酶通常由耐有机溶剂极端微生物产生,筛选耐有机溶剂极端微生物成为获得天然耐受有机溶剂蛋白酶的主要手段。目前已经有假单胞菌[6]、蜡状芽孢杆菌[7]及沙雷氏菌[8]等产耐有机溶剂蛋白酶的报道。已报道的耐有机溶剂蛋白酶一般对疏水性具有耐受性,对亲水性有机溶剂耐受性较弱,且对pH变化较为敏感,在非最佳pH的反应体系中活力显著降低。因此,筛选到具有良好性质的耐有机溶剂蛋白酶,可以丰富耐有机溶剂蛋白酶的种类,促进该类酶的应用,并为进一步研究耐有机溶剂酶的耐受机制奠定基础。……