呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价
2018-10-24张东升严艺琳熊晓辉董曼佳游京晶张一平
张东升,严艺琳,熊晓辉,董曼佳,游京晶,张一平
(1.江苏省苏微微生物研究有限公司,江苏无锡 214063; 2.南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京 211800)
呕吐毒素,又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),是一种由小麦赤霉病菌、禾谷镰刀菌复合群产生的单端孢霉烯族化合物[1]。据报道,小麦赤霉毒素爆发频率增加,DON成为小麦增产与质量安全的主要威胁,尤其是我国长江流域、黄河流域等重要冬麦区[2-3]。1998年,在国际癌症研究机构公布的评价报告中,DON被列为第3类致癌物,对人类及动物的健康构成了威胁[4]。欧盟要求供人食用的玉米、燕麦小麦中DON含量为低于1.75 mg/kg[5];国内要求谷物及其制品的DON限量为1.0 mg/kg[6]。
目前,DON的检测方法主要有酶联免疫法(ELISA)[7-8]、胶体金免疫层析法(GICA)[9-10]和高效液相色谱法(HPLC)[11-12]。其中ELISA法虽操作简单、灵敏度高,但不适合现场检测,且假阳性率高;GICA法虽然适合现场检测,但灵敏度低,但不能准确定量。HPLC为国标第二法,前处理需免疫亲和柱净化,成本高、时间长。荧光定量免疫层析是以镧系元素铕的螯合物纳米微球为荧光探针,并结合医学床边检验(POCT)的免疫层析技术[13-16],该法因简便、灵敏度高及准确定量等特点,而被广泛应用。
针对粮食收购、储运及加工等环节,急需快速、灵敏、准确检测DON的方法。近年来,高雷等[17]建立了高灵敏DON时间分辨荧光试剂盒的方法,虽灵敏度很高,但检测时间长,且需要昂贵的96孔时间分辨荧光仪;肖理文等[18]对DON时间分辨荧光层析卡的技术性能进行了初探,但制备环节不详。本……
