何 静 郭小青 陈元平 欧阳玉茗

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是肠胃道中较为常见的恶性肿瘤之一，由于早期表现的症状不明显，患者很难发现，但是结直肠癌的发病率和死亡率在我国乃至全世界都呈现上升的趋势[1]，严重威胁着人类健康。手术是治疗结直肠癌的主要手段[2]，化疗明显改善预后。但晚期结直肠癌疗效差，且尚无标准治疗方案。因结直肠癌的发生发展是多种癌基因协同作用的结果，因此针对这些靶基因的靶向药物如西妥昔单抗具有疗效独特、毒副作用小等特点，为晚期结直肠癌的治疗提供了较好的前景[3]。

医学界的科学家们通过不断地研究，发现人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)属受体酪、氨酸激酶家族 HER/erbB 家族成员[4]，位于人类第17号染色体的长臂，参与细胞生长分化的调节，不仅能够抑制肿瘤细胞凋亡，还具备着增加肿瘤细胞的侵袭力[5]。有研究证实HER-2在乳腺癌、胃癌、食管癌、卵巢癌、肺癌，前列腺癌等多种恶性肿瘤中都存在过表达，是乳腺癌的预后因子[6]。针对HER-2的靶向药物曲妥珠单抗已经在乳腺癌，胃癌中广泛应用，疗效显著，但是肠道肿瘤中HER-2蛋白表达相关方面的研究却存在着不足，由于案例较少，一致存在争议。因此，对HER-2与结直肠癌两者之间的关联做进一步研究，具备极大的价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集赣州市人民医院2006年1月至2012年5月经外科手术切除的结直肠组织120例，之前均未进行过放化疗，其中结直肠癌组织50例，正常结直肠组织30例。选取组织样本时，需要注意尽可能地保持样本外观的完整性，在切取样本时，选择样本的中心位置进行切取，可以有效地避免对实验结果造成偏差。在本次选取的组织样本中，肿瘤组男性和女性分别有30例、20例，50例患者的平均年龄为(50.7±3.3)岁；另一组正常组男性和女性分别有18例、12例，平均年龄为(51.2±3.1)岁。通过对2组一般资料进行比较，发现其差异并不具备统计学意义，P>0.05。

1.2 HER-2检测

一抗(兔抗人HER-2)、二抗购自Santa Cruz公司，多聚甲醛、二甲苯、3%双氧水、DAB显色液、苏木精、中性树胶购自北京中杉金桥生物技术有限公司。新鲜标本离体后在40 g/L多聚甲醛中常规固定，脱水，石蜡包埋，将其制成5 μm切片。后按照试剂盒说明书操作。每组均设立阳性对照组和阴性对照组。每例标本均有2位有经验的技术人员采用双盲法判断。显微镜下细胞质和(或)核内有着棕黄色的颗粒者为阳性。当出现(-)时，则表明样本中结直肠癌细胞未染色或少于10%胞膜染色；当出现(+)时，则表明样本中，有大于10%的细胞具备不完整的胞膜染色；当出现(++)时，则表明样本中，有大于10%细胞具备完整但是较弱的胞膜染色；当出现(+++)时，则表明样本中，有大于30%细胞具备完整而且较强的胞膜染色。HER-2阳性为(++)或(+++)。阳性率的计算：判定为(++)和(+++)数量的总和除以总样本数所得的百分数。

1.3 统计学方法

本次HER-2在结直肠癌组织中表达情况的研究，在统计软件上选用SPSS 17.0，而对于本次实验研究涉及到的数据，采用χ2和Pearson进行相关检验，当P<0.05时，则表明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组HER-2阳性率比

肿瘤组HER-2表达阳性表达率为36.0%(18/50)、正常组为10.0%(3/30)，2组差异具有统计学意义(χ2=6.547，P<0.05)。

2.2 HER-2阳性与结直肠癌生物学以及临床病理特征关系

通过实验研究，并进行分析可以了解到HER-2基因表达阳性与患者结直肠癌的Dukes分期、分化程度以及患者的淋巴结转移具有相关性(P<0.05)，但是与结直肠癌患者的年龄、部位以及远处转移等无关(P>0.05)，见表1。

表1 HER-2阳性与结直肠癌生物学以及临床病理特征关系(例，%)

2.3 HER-2表达水平与患者生存时间的关系

调取标本的病例资料，统计5年生存率。结果HER-2阴性，即HER-2(-)和HER-2(+)患者5年生存率为68.2%(15/22)；而HER-2阳性，即HER-2(++)和HER-2(+++)患者5年生存率为33.3%(6/18)，二者差异有统计学意义(χ2=4.821，P=0.03)。

3 讨论

HER-2 是一种癌基因,通过基因扩增、RNA 及蛋白质的过度表达而激活。HER-2具备加速细胞分裂和蛋白水解酶分泌的作用，那么也就意味着细胞的运动能力增强，而相应的患者体内肿瘤细胞的侵袭和转移的几率增大[7]。Slamon等[8]发现HER-2基因在乳腺癌中存在扩增现象，此后发现其在胃癌等多种恶性肿瘤中存在不同程度的基因扩增或过度表达。目前国内和国外对HER-2与结直肠癌的关系，还存在着较大的争议。Marx 等[9]对1851 例结肠癌确诊病例进行分析，通过FISH方法检测HER-2基因扩增为2.7%，并且发现HER-2基因扩增并不能直接对结直肠癌的侵袭与转移情况进行预测，主要原因在于其与结直肠癌的发生、Dukes分期以及预后等并没有相应线性关系。我国涂金花[10]报道，运用FISH及免疫组化方法检测结直肠癌中HER-2基因的扩增率为2.5%～7.4%，过表达率为2%～47.4%，存在较大的差异，且表明Her-2过表达可作为结直肠癌患者的一个独立预后因素。

本研究结果显示，结直肠癌组织中HER-2表达阳性18例(36.0%)，正常组织中阳性3例(10.0%)，2组差异有统计学意义(P<0.05)，由此表明HER-2基因的表达可以说是结直肠癌的指示信号。此外，通过对HER-2基因的表达与结直肠癌的病理特征进行研究，可以了解到HER-2基因过表达与结直肠癌Dukes分期、分化程度以及患者的淋巴结转移相关(P<0.05)；但是HER-2基因过表达与左右半、肿瘤大小、远处转移无关(P>0.05)。结直肠癌患者中，HER-2 阴性的5年生存率为62.4%，HER-2阳性5年生存率为42.7%，2组差异有统计学意义(P<0.05)，HER-2 阳性患者的5 年生存率明显较低。

曲妥珠单抗为针对HER-2的单克隆抗体，因能明显改善HER-2阳性乳腺癌患者的生存而得到广泛应用。Van等[11]研究发现HER-2 过表达的晚期胃癌患者在曲妥珠单抗治疗中明显获益，联合化疗的总生存期为16个月，单独化疗平均仅为11.8个月，而且HER-2蛋白过表达及基因扩增者对曲妥珠单抗的疗效较单一蛋白过表达的要好，且蛋白表达水平与总生存相关。因此欧盟委员会于2010年也批准曲妥珠单抗用于 HER-2 阳性晚期胃癌。

曲妥珠单抗作为抗HER-2的靶向药物，有必要在结直肠癌临床应用中进一步研究，为结直肠癌的治疗提供更多方法。

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[5] 田晓云,孙国平.Her-2/neu 蛋白抑制剂在胃癌化疗中的应用〔J〕.安徽医药，2010,14(4):467-470.

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[7] 李骏白，黄瑞燕.HER-2 基因过表达的乳腺癌病人内分泌治疗探讨〔J〕.江西医药,2007,42(4):362-363.

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