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重组枯草芽孢杆菌素subtilosin A基因的合成及其在毕赤酵母中的表达

2016-09-14陈柏雄黄佳俊林俊芳郭丽琼陈俊飞刘英丽华南农业大学食品学院生物工程系华南农业大学食品生物技术研究所广东广州50640齐鲁工业大学化学与制药工程学院山东济南505北京工商大学食品质量与安全北京实验室北京00048

食品工业科技 2016年4期

陈柏雄,黄佳俊,林俊芳,*,郭丽琼,*,陈俊飞,刘英丽(.华南农业大学食品学院生物工程系,华南农业大学食品生物技术研究所,广东广州50640;.齐鲁工业大学化学与制药工程学院,山东济南505;.北京工商大学食品质量与安全北京实验室,北京00048)

重组枯草芽孢杆菌素subtilosin A基因的合成及其在毕赤酵母中的表达

陈柏雄1,黄佳俊1,林俊芳1,*,郭丽琼1,*,陈俊飞2,刘英丽3
(1.华南农业大学食品学院生物工程系,华南农业大学食品生物技术研究所,广东广州510640;2.齐鲁工业大学化学与制药工程学院,山东济南250353;3.北京工商大学食品质量与安全北京实验室,北京100048)

人工改造并合成subtilosin A的结构基因(rsbo A),并在毕赤酵母中诱导表达重组蛋白。结果表明:经阳性大肠杆菌转化子菌落PCR和测序鉴定,表明重组质粒pPIC9K-sbo构建正确;经阳性酵母转化子的菌落PCR产物电泳检测,可见清晰目的基因条带,证明重组酵母GS115-pPIC9K-sbo构建正确;经枯草芽孢杆菌素蛋白电泳检测,可见明显蛋白条带,表明重组rsbo A基因在毕赤酵母GS115中获得了分泌表达。在抑菌效果检测中,重组酵母工程菌的发酵液对铜绿假单胞菌具有一定的抑菌活性。本研究开创了有望替代抗生素的小分子肽细菌素异源表达新思路,为枯草芽孢杆菌素subtilosin A的工业化生产奠定了基础。

subtilosinA,基因重组,毕赤酵母,抗菌活性

细菌素是由微生物合成的具有抑制特定微生物生长的一种多肽,由于其抑菌的特异性,有望成为替代抗生素成为新一代的治疗细菌感染的药物。枯草芽……

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