赵　军，陈泽平，李　桢，宋小宁，李玉锋（西华大学食品与生物工程学院，四川成都610039）

二重LAMP检测鸡蛋污染致病菌

赵军，陈泽平，李桢，宋小宁，李玉锋*
（西华大学食品与生物工程学院，四川成都610039）

为快速检测污染鸡蛋的致病菌，实验从鸡蛋蛋体表面得到2株菌X1、X2，结合16S rRNA克隆及质粒测序分子方法对2株菌分类分析，发现2株菌X1和X2分别为：蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus NC7401（AP007209）、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus（AP003088）。针对两种菌的nhe、nuc基因具有较强的保守性，设计2套环介导等温扩增（LAMP）引物。先进行反应体系优化，得到25 μL LAMP反应体系最适温度为60℃、最适MgSO4添加量为1.5 μL，引物最适量为2.0 μL。再进行二重LAMP鉴定2株污染鸡蛋的致病菌，发现目的菌X1和X2的特异性扩增结果为阳性，其他9株非目的菌扩增结果为阴性，其灵敏度检测限达10 fg/μL。此二重LAMP检测法有快速、特异、灵敏的特点，可快速检测食源性致病菌。

鸡蛋，致病菌，16S rRNA，环介岛等温扩增技术，快速检测

现阶段我国及世界对食品安全关注度越来越高。鸡蛋营养丰富，在我国的人均食用量逐年升高，近年来鸡蛋却经常出现食源性致病菌污染的安全问题，成为国内外消费者关注的焦点［1-2］。鸡蛋会被沾上的粪、毛等污染物“二次污染”，常见的致病菌沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等通过蛋壳表面残留物进行生长、代谢、传播［3-4］，增加了食品安全的风险。

环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术［5］是日本学者2000年发明的一种新型的恒温核酸扩增技术，因其独特的核酸反应机理，产物在琼脂糖凝胶电泳上会呈现出其典型的阶梯状条带，结果鉴定方便快捷，非常适合食源性致病菌的快速检测。……