杜敬河,王　栩,朱永安,吴凤英,段　杉,*

(1.华南农业大学食品学院,广东广州 510642;2. 广东省天然活性物工程技术研究中心,广东广州 510642;3.广东永昊食品有限公司,广东阳江 529536)



产甲壳素酶多粘类芽孢杆菌A1的筛选鉴定及发酵产酶条件研究

杜敬河1,2,王栩1,朱永安1,吴凤英3,段杉1,2,*

(1.华南农业大学食品学院,广东广州 510642;2. 广东省天然活性物工程技术研究中心,广东广州 510642;3.广东永昊食品有限公司,广东阳江 529536)

从土壤中分离得到一株产甲壳素酶的细菌,经形态学、生理生化及分子生物学鉴定,确定为多粘类芽孢杆菌,命名为A1。研究发现甲壳素、壳聚糖和淀粉可诱导该菌产甲壳素酶;添加尿素可提高甲壳素酶产量。本文研究确定该菌发酵产酶条件如下:培养基采用1%甲壳素(120目),0.05% MgSO4·7H2O,1.2%尿素,0.5% NaCl,0.07% K2HPO4,0.03% KH2PO4,0.3%酵母提取粉,初始pH4.5,接种龄12 h,接种量1%,于37 ℃培养78 h,在此条件下,该菌产甲壳素酶水平达到0.549 U/mL。该菌在对数期,其产酶曲线的上升略滞后于生长曲线变化;而在衰亡期,产酶曲线的降低略早于生长曲线的降低,说明该酶的mRNA的稳定性较差。

甲壳素酶,多粘类芽孢杆菌,发酵条件

甲壳素(chitin)又称几丁质,广泛存在于虾、蟹等甲壳类动物以及低等生物菌类、藻类细胞中,是自然界中产量仅次于纤维素的第二大生物资源,它是由N-乙酰氨基-D-葡萄糖单体(D-GlcNAc)通过β-1,4糖苷键连接而成的直链高分子化合物[1-3]。甲壳素酶(chitinase E.C.3.2.1.14)又称几丁质酶,可以降解甲壳素生成甲壳寡糖。甲壳寡糖是甲壳素糖链β-1,4糖苷键断裂形成的寡聚体,具有抑菌、抗肿瘤、保湿、提高植物防御力等功能[4],已被广泛应用到各个领域。……