王健，方建军（衢州市食品药品检验研究院，浙江衢州324000）

HPLC快速测定月饼中5种添加剂

王健，方建军*
（衢州市食品药品检验研究院，浙江衢州324000）

建立快速、简便、高效、准确测定安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的高效液相色谱方法。将月饼样品充分粉碎，加超纯水，用超声辅助提取，过滤后定容，0.45 μm微孔滤膜过滤上机检测。5种食品添加剂在1.00 μg/mL～50.00 μg/mL的范围具有良好线性，相关系数在0.995以上，加标回收率在90%～100%之间，RSD在5%以内，表明试验方法准确可靠。

安赛蜜；苯甲酸；山梨酸；糖精钠；脱氢乙酸

食品添加剂是为了改善食品品质和色、香、味以及为满足防腐和加工工艺的需要而加入食品中的化学合成物或者天然物质。甜味剂是赋予食品甜味的添加剂，可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂［1］。防腐剂是指一类加入食品中能防止或延缓食品腐败的食品添加剂，其本质是具有抑制微生物增殖或杀死微生物的一类化合物。安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸属于食品中常见的食品添加剂，其中安赛蜜、糖精钠属于甜味剂，苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸属于防腐剂。食品添加剂是有机化工产品，除了防止食物腐败变质和味觉上给人甜的感觉，毫无营养价值，但是违禁、滥用以及超范围、超标准使用添加剂，都会给食品质量、安全卫生以及消费者的健康带来巨大的损害。近年来，由于消费者的食品安全意识日益增强，各种食品添加剂的使用情况越来越受到人们的关注与重视。在我国《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中对其使用范围和相应限量均有明确规定［2］。

目前，国标报道的分析方法多是针对这些添加剂中的一种或几种［3-7］，而关于这5种食品添加剂同时检测的报道甚少，因此建立一种快速准确且能够同时测定食品中这5种食品添加剂的检测方法十分必要。由于高效液相色谱法同时具备分离效能高、选择性强、灵敏度高、分析速度快等优点，因此，在食品分析检测中应是目前进行上述物质分析的首选方法。本试验探讨了采用反相高效液相色谱法同时测定月饼中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的方法。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂

1.1.1仪器

1260高效液相色谱仪：安捷伦。

1.1.2试剂

甲醇、超纯水，乙酸铵、标准品（安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸）纯度≥99%。

1.2标准溶液的配制

准确称取5种标准品1mg，用超纯水定容至10mL，配成0.1 g/L的标准储备液，至于4℃冰箱中避光保存。使用时用超纯水逐级稀释储备液，配制成1.00、5.00、10.00、20.00、50.00 μg/mL的标准溶液。

1.3样品提取

本实验与现有的国家标准所用的提取溶剂的区别见表1。

表1　本试验与现有的国家标准所用的提取溶剂的区别Table 1　The difference between the present experiment and the existing standard

由表1可知，本试验采用的提取溶剂的种类最少、无污染、低成本、操作简单方便，符合当前倡导的资源节约型和环境友好型思想。

准确称取充分粉碎的月饼5 g（精确到0.01 g）于100 mL烧杯中，加入超纯水40 mL左右，超声提取10 min，用中性滤纸过滤到50 mL容量瓶中，用超纯水定容，待检测。

1.4液相色谱条件

1）色谱柱：YWG-C18 4.6 mm×250 mm 10 μm不锈钢柱。

2）流动相：甲醇∶乙酸铵溶液（0.02mol/L）=5∶95。

3）流速：1 mL/min。

4）检测器：紫外检测器，230 nm波长，0.2AUFS。

2　结果与讨论

2.1线性范围和检出限

将事先配制好的系列标准溶液（1、5、10、20、50 μg/mL）经上机检测，绘制标准工作曲线，线性方程、线性范围及相关系数见表2，色谱图见图1。

表2　5种添加剂的线性方程、线性范围及线性相关系Table 2　Linear equation，linear range and linear phase relationship of five additives

图1　5种食品添加剂混合标准品色谱图Fig.1　Five kinds of food additives mixed with standard spectra

由表2可知5种食品添加剂的线性范围在1μg/mL～50 μg/mL，相关系数在0.995以上，线性良好。

2.2加标回收、精密度及检测限

在月饼中添加了100 μg/kg的5种食品添加剂混合标准品，进行液相色谱测定，其回收率及精密度见表3，按S/N=3计算5种添加剂的最低检出限，结果表3。

由表3可知5中添加剂的加标回收率在90%～100%之间，RSD在5%以内，表明试验方法准确可靠。

3　结论

本试验采用低成本，无污染的超纯水提取样品中的5种食品添加剂的简便方法，在结果准确可靠的前提下，可以在时间短的情况下，利用高效液相色谱仪进行分析检测，大大提高了工作成本和工作效率。本试验最大的优点是一次性对5种食品添加剂进行了检测，并且前处理提取方法比现有标准都简单，步骤少，避免繁琐操作步骤带来的损失。5种食品添加剂在1.00 μg/mL～50.00 μg/mL的范围具有良好线性，相关系数在0.995以上，加标回收率在90%～100%之间，RSD在5%以内，表明试验方法准确可靠。

表3　5种添加剂的加标回收、精密度及检出限Table 3　Five kinds of additives，recovery，precision and detection limit

［1］邓珍珍，关宁.食品甜味剂糖精钠的检测方法探究［J］科技传播，2011（7）：115-116

［2］中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB2760-2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准［S］北京：中国标准出版社，2015

［3］中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.121-2003食品中脱氢乙酸的测定［S］.北京：中国标准出版社，2004

［4］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.GB/T 23377-2009食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法［S］.北京：中国标准出版社，2004

［5］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.28-2003食品中糖精钠的测定［S］.北京：中国标准出版社，2004

［6］中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.140-2003饮料中乙酰磺胺酸钾的测定［S］.北京：中国标准出版社，2004

［7］中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的测定［S］.北京：中国标准出版社，2004

HPLC Rapid Determination of Five Kinds of Additives in Moon Cake

WANG Jian，FANG Jian-jun*
（Quzhou City Food and Drug Inspection Institute，Quzhou 324000，Zhejiang，China）

A rapid，simple，efficient and accurate method based on HPLC was developed for determination of acesulfame potassium，benzoic acid，sorbic acid，sodium saccharin and dehydroacetic acid in moon cake.The moon cake sample was ultrasonically extracted by ultrasonic extraction with ultrapure water，the supernatant was constant volume after filtered with ltrapure water，then the sample was tested after filtered by 0.45 μm microporous membrane.The linear range of the method was 1.00 μg/mL-50.00 μg/mL with a correlation coefficient of 0.995.The average recovery among 90%and 100%，relative standard deviations（RSD）within 5%，which indicated the research method was accurate and reliable.

acesulfame potassium；benzoic acid；sorbic acid；sodium saccharin；dehydroacetic acid

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.10.038

王健（1986—），男（汉），助理工程师，本科，从事食品安全检测与研究。
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方建军（1983—），男（汉），工程师，硕士研究生，从事食品安全检测与研究

2015-05-22