糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养及Notch信号通路对其细胞增殖及凋亡的研究①
2016-08-03汪宝林范东旭冯东凡
汪宝林,金 松 ,范东旭 ,冯东凡, 谢 涵
(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003)
糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养及Notch信号通路对其细胞增殖及凋亡的研究①
汪宝林,金松 ,范东旭 ,冯东凡, 谢涵
(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003)
摘要:目的:应用γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对Notch信号通路进行干预后采用流式细胞学技术检测并探讨DM大鼠VSMCs细胞增值及凋亡机制。方法:应用腹腔内注射链脲佐菌素的方法对大鼠进行糖尿病造模。造模后别于CON组和DM组(1、2、3、4)各组中随机取出1只SD大鼠,取出主动脉并制备成细胞悬液,在细胞培养箱培养一段时间后进行传代,应用不同梯度浓度γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对Notch信号通路进行干预,流式细胞技术检测DM大鼠VSMCs细胞增值及凋亡情况。结果:不同梯度浓度的DAPT作用DM大鼠VSMCs72h后行流式细胞仪分析,G0/G1期细胞比例由39.97%上升为72.32%,S 期的细胞比例从41.10%下降为19.87%,凋亡数却从3.1升高至15.4(P<0.05)。结论:DAPT能影响DM大鼠VSMCs的细胞周期,减少DM大鼠VSMCs的有丝分裂,抑制细胞增殖反向增加细胞凋亡数,这二者作用均具有依赖性且呈正相关。
关键词:Notch信号通路;血管平滑肌细胞;体外培养;流式细胞学技术;细胞增殖;细胞凋亡
目前,对于糖尿病足的治疗大多处于内科治疗联合局部清创治疗为主,截趾、截跖、截肢是最终结果[1]。介入治疗和血管重建需要的设备精密价格昂贵,手术费用高,并发症多,术后再狭窄率高[2]。相关实验性研究表明,Notch信号通路能促进非糖尿病动物缺血区的血管新生、动静脉分化等[3]。本课题研究DM大鼠主动脉VSMCs体外培养及Notch信号通路受干预后对其影响的情况,以及可能的信号转导机制,为进一步研究DM缺血区血管新生提供实验理论依据。……
