冯佳丽　何新叶　笪荣辉　金奎　何志勇　陈洁

摘要[目的]深入探讨南烛叶多酚氧化酶（PPO）的酶学性质，对南烛叶PPO的最适提取条件进行研究。[方法]以南烛叶为原料，分别研究了交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）添加含量、料液比、浸提时间和pH各因素对其提取的PPO酶活的影响。[结果]试验表明，适量南烛叶粉末，以料液比1∶15 g/mL，加入含9%PVPP（W/V）pH 7.6的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液（0.1 mol/L），匀浆并于4 ℃下浸提9 h，过滤，滤液经冷冻离心（4 ℃，12 000 r/min，20 min）后得到酶活最高的PPO酶液（11 335 U/mL）。[结论]研究结果可为促进南烛叶的工业化应用提供参考。

关键词 南烛叶；多酚氧化酶；酶活；提取

中图分类号 S789.4 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2016）05-128-03

Abstract[Objective]The aim was to explore the enzymatic properties of PPO from Vaccinium bracteatum Thunb leaf and research the optimum extraction conditions of PPO.[Method]Effects of PVPP content， solidliquid ratio， extraction time， pH on PPO enzyme activity were studied respectively.[Result]The results showed that appropriate amount of V. bracteatum power was added into citric acidphosphate buffer （0.1 mol/L pH 7.6） containing 9% PVPP（W/V） with solidliquid ratio 1∶15 g/mL， extracted at 4 ℃ for 9 h， through filtering， centrifuging at 4 ℃， 12 000 r/min for 20 minutes， PPO with the highest enzyme activity （11 335 U/mL） was obtained.[Conclusion]The study can provide reference for promoting industrialized application of V. bracteatum leaf.

Key words Vaccinium bracteatum Thunb leaf； Polyphenol oxidase（PPO）； Enzyme activity； Extraction

南烛（Vaccinium bracteatum Thunb），又名乌饭树，属杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium），由于江浙、福建、湖广一带以其茎叶浸渍染米，加工乌饭，故而得名。研究南烛叶多酚氧化酶（PPO）的最适提取条件，可为南烛叶PPO的分离纯化以及南烛叶染色机制的相关研究奠定基础。目前，植物活体内直接提取PPO的方法有丙酮法、匀浆法等，PPO可分为游离态和束缚态2种，通常用丙酮法提取所得的是PPO总酶活，而用匀浆法提取所得则为可溶性酶活性[1]。很多试验表明，匀浆法有助于游离态可溶性酶活性提高。李立祥等以安徽农业大学茶园福鼎大白茶品种一芽二叶以及一芽三叶初展为原料时，利用匀浆法和匀浆浸提法进行酶活测定的试验数据显示，匀浆浸提对PPO活性确有提高，其原因为：一方面缓冲液匀浆法增大了料液的接触面积，酶蛋白易于溶出，同时也可使束缚态的PPO部分转化为可溶性的酶溶出，使得PPO酶得率提高；……