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中学生开展DNA“细”提取的实践初探

2016-11-19王天钰季欣怡章熙东

中学生物学 2016年10期
关键词:提取

王天钰+季欣怡+章熙东

摘 要 以鲫鱼的肌肉、卵和鳃的新鲜冷冻样品为实验材料,比较用传统方法和试剂盒法提取DNA的浓度和纯度。结果表明:从以上三种动物不同样品组织中均能提取到比较纯净完整的基因组DNA(A260/A280在1.8~2.0之间),而且从鱼卵、鱼鳃中提取的全基因组DNA浓度优于肌肉,能够更好的适用于后续的分子生物学试验研究。传统提取法DNA含量显著高于试剂盒法。

关键词 动物 基因组DNA 提取

中图分类号 Q-331 文献标志码 B

1 问题的提出

在苏教版生物必修2教材中安排了“DNA粗提取和鉴定”实验,以此加深学生对DNA这种细胞内重要有机物的了解。通过鸡血或香蕉细胞中DNA的粗提取实践,提取到了较多的絮状物。但对絮状物中DNA的含量是多少,老师并为对此做出讲解,由此激发了我们继续的探究欲望,因此继续进行DNA的细提取和DNA纯度检测实验。

2 问题的解决

天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。要从细胞中提取DNA时,先把DNP抽提出来,把P(蛋白质)除去,再除去细胞中的糖、RNA及无机离子等,从中分离出DNA。制备高纯度的DNA溶液是进行基因结构和功能研究的重要步骤,通常要求得到的片段的长度不小于100-200 kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验(如PCR)打下基础。由于DNA分子在生物体内的分布和含量不同,要选择合适的材料和方法提取DNA。DNA的提取方法有多种,比如SDS-蛋白酶K消化法、CTAB法和试剂盒法等。

2.1 实验准备

实验材料:鲫鱼(三种组织:鱼卵、鳃、肌肉)

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