田 甜， 冷 洁， 赵 晶， 高向阳， 宋 超， 高 超

1.徐州医科大学研究生学院2013级，江苏 徐州 221004； 2.徐州医科大学附属医院肿瘤科

唑来膦酸对人直肠癌COLO320细胞体外增殖和凋亡的影响

田 甜1， 冷 洁1， 赵 晶2， 高向阳2， 宋 超2， 高 超2

1.徐州医科大学研究生学院2013级，江苏 徐州 221004； 2.徐州医科大学附属医院肿瘤科

目的 探讨唑来膦酸(Zoledronic acid，ZOL)对人直肠癌细胞株COLO320体外增殖和凋亡的影响，及其诱导凋亡可能的分子机制。方法 采用CCK-8法检测不同浓度ZOL作用不同时间对COLO320细胞增殖的影响，并计算半数致死量(IC50)及增殖抑制率；采用流式细胞术(flow cytometry，FCM)分析ZOL对细胞凋亡的影响；采用Western blotting和实时定量PCR(Real-Time PCR)检测ZOL作用直肠癌COLO320细胞72 h后相关凋亡基因Bad、Bcl-2、Bax和Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平。结果 与对照组相比，ZOL处理组的直肠癌COLO320细胞增殖受到明显抑制，呈剂量和时间依赖性(P<0.05)，24、48、72和96 h的IC50分别是209.4、103.6、74.1、65.6 μmol/L；且ZOL对COLO320细胞增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性。FCM示不同浓度ZOL处理直肠癌COLO320细胞72 h后的凋亡率较对照组均有不同程度升高，但20 μmol/L浓度组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)，其余各组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。ZOL处理72 h后的COLO320细胞凋亡相关基因Bcl-2的表达水平下降，Bax、Bad、Caspase-9的表达升高。RT-PCR显示，Bcl-2 mRNA表达下调，Bax、Bad、Caspase-9 mRNA表达升高。 结论 ZOL对人直肠癌COLO320细胞的增殖有抑制作用，对其凋亡有诱导作用。

直肠癌；唑来膦酸；COLO320细胞；增殖；凋亡

唑来膦酸(Zoledronic acid，ZOL)是第3代双膦酸盐类药物，是一种高效破骨细胞抑制剂，临床上主要用于各种肿瘤骨转移和良性骨病等的治疗，并取得了安全可靠的疗效[1]。临床前研究显示，ZOL除了有抑制骨吸收作用外，还具有直接的体内外抗肿瘤作用[2-3]，并与化疗药物协同抗肿瘤，可以提高其化疗疗效[4]。理论上，ZOL的作用机制可能为：(1)抗血管生成效应[5]；(2)抑制细胞增殖，促进细胞溶解，并诱导肿瘤细胞凋亡[6]；(3)抑制肿瘤细胞扩散、浸润和黏附等。ZOL已被证实对于多种癌细胞系(如肺癌[7]、结肠癌[8]、胃癌[9]、乳腺癌[6]等)有直接抗肿瘤作用。而其对于直肠癌是否有作用目前鲜有报道。……