刘来兵， 刘　健，**， 出良钊，， 杨　华，， 李玉美

(1.贵州医科大学附属白云医院， 贵州 贵阳　550014； 2.贵州医科大学， 贵州 贵阳　550004)



人脑胶质瘤细胞体外培养与形态学观察*

刘来兵1， 刘健1，2**， 出良钊1，2， 杨华1，2， 李玉美2

(1.贵州医科大学附属白云医院， 贵州 贵阳550014； 2.贵州医科大学， 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 探讨人脑胶质瘤原代细胞体外培养的方法。方法： 手术切除脑胶质瘤患者的病灶组织，采用机械分离胰酶消化法获取胶质瘤细胞，倒置显微镜下观察胶质瘤细胞的形态学变化，通过差速贴壁、反复传代、自然纯化法获得纯度高、生物性状稳定、增殖能力强的细胞株，绘制细胞生长曲线，免疫组织化学技术鉴定原代细胞及其纯度。结果： 培养成功的原代细胞贴壁生长状态好，有明显的对数生长期；恶性程度越高细胞增殖越快，可传代培养，胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性率达93%，证明培养的细胞为纯度较高的胶质瘤细胞。结论： 机械分离胰酶消化法适合于体外胶质瘤细胞的原代培养。

[关键词]神经胶质瘤； 胰酶; 消化; 细胞培养; 生长曲线; 免疫组织化学

脑胶质瘤是发生于神经外胚层的恶性肿瘤，在成人的发病率约为6/10万，5年生存率20%～30%[1-3]。部分脑胶质瘤恶性程度高，生存期短。原代细胞刚从肿瘤组织中分离出来，包含了肿瘤细胞的各种信号，生物学特性没有发生很大的变化，仍保留原来的遗传学特性，这样培养出的肿瘤细胞与在体肿瘤细胞的真实状态最接近, 是研究抗肿瘤药物作用机制及肿瘤基因表达的理想细胞模型[4]。……