脑通汤对缺氧-复氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用*
2016-04-13况时祥张树森邹家莉
何 筑, 况时祥, 张树森, 邹家莉
(1.贵阳市第三人民医院, 贵州 贵阳 550000; 2.贵阳中医学院第二附属医院, 贵州 贵阳 550003)
·基础研究·
脑通汤对缺氧-复氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用*
何筑1, 况时祥2**, 张树森2, 邹家莉2
(1.贵阳市第三人民医院, 贵州 贵阳550000; 2.贵阳中医学院第二附属医院, 贵州 贵阳550003)
[摘要]目的: 探讨脑通汤对缺氧-复氧损伤脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用及机制。方法: 将大鼠原代BMECs培养传代至第二代,分为对照组、正常血清组、缺氧-复氧模型组、大、中、小剂量脑通汤含药血清组,后5组细胞均放入三气培养箱中持续通入95% N2和5% CO2混合气体缺氧24 h再复氧2 h制作脑缺血再灌注细胞模型;采用MTT法检测缺氧24 h和复氧2 h时 BMECs的活性并计算细胞存活率,实时荧光定量PCR法检测BMECs中HIF-1α、VEGF、MMP-9 mRNA的表达。结果: 缺氧24 h时,模型组的BMECs的活性及存活率较对照组明显下降(P<0.05),与正常血清组及各剂量含药血清组比较差异无统计学意义(P>0.05);复氧2 h时各剂量含药血清组BMECs的活性及存活率均较模型组明显升高(P<0.05),正常血清组与模型组差异无统计学意义(P>0.05);模型组HIF-1α、VEGF、MMP-9 mRNA的表达量均升高(P<0.05),与模型组比较,各剂量含药血清组的HIF-1α、VEGF mRNA的表达量明显升高,MMP-9 mRNA的表达量明显下降,脑通汤大、中剂量组变化更显著(P<0.01);正常血清组与模型组比较上述3种mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 脑通汤可以保护缺氧-复氧损伤的BMECs,其机制可能与其能上调HIF-1α、VEGF mRNA表达以及下调MMP-9 mRNA表达有关。
[关键词]脑通汤; 缺血再灌注; 脑微血管内皮细胞; 血脑屏障; 通透性
缺血性脑血管病是导致血管性痴呆(vascular dementia,VD) 的主要病因[1],缺血再灌注损伤参与并介导了缺血性脑血管病的重要病理生理过程[2]。研究认为血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)结构及功能的损伤不仅参与脑缺血再灌注损伤的病理生理[3],也与VD的发生发展密切相关[4]。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是检测BBB的结构及功能损伤时常用到的指标。……
