张宝娜,朱灿灿,张鹏钰,卫　丽,王　翔,姜玉梅,王同朝

(1.河南农业大学 农学院,河南 郑州　450002;2.河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心,河南 郑州　450002)



普通小麦春化基因VRN1 RNA干扰载体构建及转基因小麦获得

张宝娜1,朱灿灿2,张鹏钰1,卫丽2,王翔2,姜玉梅2,王同朝1

(1.河南农业大学 农学院,河南 郑州450002;2.河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心,河南 郑州450002)

摘要：为进一步探究春化基因VRN1在小麦发育进程中的功能,利用荧光定量PCR分析了VRN1基因在不同发育特性小麦品种新春2号、京841中的表达情况。结果表明,随着生育进程的推进,VRN1基因在新春2号叶片和茎尖中表达量均呈上升趋势,VRN1基因在京841叶片中呈波动上升趋势,在茎尖中表达量趋于0;以pFGC5941载体为基础构建含有VRN1反向重复序列的 RNA干扰载体,利用农杆菌介导的茎尖转化法转化新春2号获得了再生植株,并通过PCR法检测获得了转基因阳性植株,为从分子水平上实现小麦发育特性遗传改良和创育小麦新种质奠定了基础。

关键词：小麦;春化基因VRN1;表达;转化

小麦春化作用是一个高度复杂的生理生化过程,也是小麦(TriticumaestivumL.)生长发育进程中的一个重要阶段,受多基因调控。小麦春化作用主要受VRN1、VRN2、VRN3、VRN4等基因调控[1-3]。普通小麦VRN1基因有3个同源基因,VRN-A1、VRN-B1和VRN-D1[4-7]。3个同源基因中任何一个基因的调控区发生插入、缺失,就能使VRN1基因变为显性,导致小麦发育特性表现为春性即不需要经过春化作用就能抽穗开花[8-9]。前人研究表明,VRN1是小麦春化作用所必需的关键基因[1,10-11]。……