罗　岸,詹　领

(1.长江大学 生命科学学院,湖北 荆州　434023;2.武汉大学 生命科学学院,湖北 武汉　430072)



烟草脱水素基因NtDEH1的克隆及研究

罗岸1,詹领2

(1.长江大学 生命科学学院,湖北 荆州434023;2.武汉大学 生命科学学院,湖北 武汉430072)

摘要：为研究脱水素在植物早期胚胎发育中的作用和机理，采用显微操作技术获得烟草卵细胞并构建其cDNA文库，从中筛选到一个脱水素基因NtDEH1。通过RACE技术获得该基因全长，基因组测序结合生物信息学分析表明该基因拥有一段长度为651 bp的完整开放阅读框和一段535 bp的内含子，编码由217个氨基酸残基组成的蛋白质，其理论等电点为5.27，属于酸性蛋白，且具有一定的亲水性。氨基酸序列比对分析发现在许多物种比如绒毛状烟草、林烟草、甜辣椒、番茄、马铃薯和丹参中都具有与NtDEH1蛋白非常类似的保守的同源序列，均具有SK2型脱水素特征。借助Genome walking技术获取NtDEH1基因约1 706 bp的5′侧翼序列，使用小叶烟草瞬时表达系统检测到其具有较强的启动子活性。该研究为进一步了解脱水素基因NtDEH1在植物生殖发育中的具体功能打下基础。

关键词：烟草;脱水素;基因克隆;NtDEH1;启动子;卵细胞

在高等植物的整个生命周期里可能会遇到多种多样的非生物胁迫,其中细胞缺水是较为常见的一种。因此，植物细胞为了抵抗干旱、低温和高盐胁迫引起的缺水状况,会应激产生一系列亲水性蛋白来维持其自身的正常生理代谢活动[1]。由于最初发现的这类蛋白在棉花胚胎发育的晚期表达,所以被称之为LEA蛋白(Late embryogenesis abundant)。……