孙　瑶，张　婵，简　洁

(桂林医学院药学院，广西 桂林　541004)

九龙藤总黄酮调控自噬对抗心肌缺血/再灌注损伤的实验研究

孙瑶，张婵，简洁

(桂林医学院药学院，广西 桂林541004)

中国图书分类号：R-332；R284.1；R329.24；R329.411；R542.2；R619.9

摘要：目的研究九龙藤总黄酮(Bauhinia championii flavones, BCF)调控自噬抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、BCF高剂量组、BCF低剂量组、自噬抑制剂(3-MA)组(n=8)，采用左冠状动脉前降支结扎法制备大鼠心肌缺血/再灌注模型，以紫外分光光度法检测缺血30min、缺血/再灌注1 h及3 h时肌酸激酶同工酶(CK-MB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、总抗氧化力(T-AOC)的含量；以Western blot法检测心肌微管相关蛋白轻链3蛋白-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin-1、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)的表达。结果与模型组相比，BCF能剂量依赖性提高心肌缺血/再灌注不同时段的T-AOC，降低CK-MB及iNOS含量，下调LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达，上调mTOR蛋白表达(P<0.05或P<0.01)；与3-MA组相比，BCF能够降低iNOS及CK-MB，提高T-AOC水平，缺血期上调LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达，再灌注期下调LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达，缺血/再灌注期均下调mTOR蛋白表达(P<0.05)。结论自噬在心肌缺血期即发生，并随着缺血/再灌注时间延长而进一步加强；BCF预处理可促进缺血期自噬发生及抑制再灌注时自噬过表达，从而减轻心肌缺血/再灌注损伤。

关键词：九龙藤总黄酮；调控；自噬；不同时段；缺血/再灌注损伤；保护作用

自噬是维持心肌细胞形态、结构和功能的关键调节因子，其在心脏疾病调节中具有双刃剑作用[1-2]：既可以延缓疾病进程，促进损伤恢复，也可以导致细胞死亡。Beclin-1介导的自噬/凋亡互反馈信号通路和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)介导的自噬/mTOR互反馈信号通路，是两条经典的自噬信号途径[3]。此外，Bcl-2和NF-κB亦影响自噬的功能[4]：Bcl-2和Beclin-1的平衡状态决定了自噬的作用，Bcl-2表达下调不仅可以诱发凋亡，而且可以通过激活Beclin-1来激活自噬，而激活NF-κB则可通过下调Beclin-1表达抑制自噬、促进凋亡。自噬的发生机制、调控因素及药物干预是目前心脏疾病研究领域的一个热点。……