离子交换层析法分离猪股骨降血压肽的研究
2015-10-21舒一梅郑丽君潘姝璇王诗熠四川农业大学食品学院四川雅安625014
舒一梅,李 诚,郑丽君,潘姝璇,陈 娜,郭 威,王诗熠,付 刚(四川农业大学食品学院,四川雅安625014)
离子交换层析法分离猪股骨降血压肽的研究
舒一梅,李诚*,郑丽君,潘姝璇,陈娜,郭威,王诗熠,付刚
(四川农业大学食品学院,四川雅安625014)
猪股骨酶解液经超滤、凝胶层析初步分离后,为了得到高活性且纯度较高的降血压肽,采用离子交换层析对凝胶层析分离后的高活性组分进一步分离。通过对洗脱液pH、离子强度、流速三个因素进行研究,确定了最佳分离条件:以pH=6.0、0.05mol/L磷酸盐缓冲液为A液、B液为含1mol/LNaCl的pH=6.0、0.05mol/L磷酸盐缓冲液,洗脱流速为0.8mL/min。结果显示:离子交换层析分离得3个组分,其中组分1的活性最高,其IC50值为0.1012mg/mL;再利用凝胶层析将组分1进行脱盐,其峰2的IC50值达到0.0836mg/mL,脱盐率达到86.60%±0.5%。
酶解,降血压肽,离子交换层析,凝胶层析,ACE半抑制浓度
降血压肽具有来源广泛、降压效果理想、天然低毒副作用等特点,是国内外一直研究的热点。利用廉价的猪股骨为原料,采用酶解的方法可以得到具有降血压活性的酶解液,但酶解液组成成分复杂,不利于降压产品的开发,必须进一步分离纯化[1-2]。离子交换层析是发展最早的层析技术之一,与化学方法相比,它分离条件温和,不引起分子结构的变化[3-4],具有灵敏度高、重复性、选择性好、分析速度快等特点,常用的有离子交换树脂、离子交换葡聚糖、离子交换纤维和离子交换琼脂糖等。目前,离子交换色谱已经成为分离提取生物活性肽的最常用的有效方法,生物活性肽通过静电作用与固定相中的带电基团结合,由于不同活性肽具有不同电荷和电荷量,所以解吸及移动速度不同,从而可以实现分离[5-6]。……
