柳金兰

【摘要】本文从教学实际出发，对实验 “分解纤维素的微生物的分离”进行了改进，使实验的操作更加简单快捷，从而能更有效的开展教学。

【关键词】改进 纤维素 微生物 纤维素酶

【中图分类号】G633.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089（2015）06-0157-01

1.前言

“分解纤维素的微生物的分离”是人教版高中生物选修教材《生物技术实践》中的一个课题，开展这一课题的主要目的是使学生掌握从土壤中筛选纤维素分解菌的技术，培养学生的动手能力，组织好这一课题的教学能激发学生学习生物学的兴趣和积极性，提高学生进行科学研究的素养。

鉴于此，本文从教学实际出发，对实验 “分解纤维素的微生物的分离”进行了改进，使实验的操作更加简单快捷，从而能更有效的开展教学，对教学具有积极的指导意义。

2.材料与方法

2.1材料

刚果红染液（1mg/mL）；NaCl溶液（1mol/L）；培养基 ：羧甲基纤维素钠（CMC—Na）5g，NaNO3 1g，Na2HPO4.7H2O 1.2g，KH2PO4 0.9g，MgSO4.7H2O 0.5g，KCl 0.5g ，酵母膏0.5g，水解酪素0.5g ，琼脂20g，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，PH6.6—6.9。超净工作台、摇床、高压灭菌锅、培养箱、微波炉、电子天平、100mL和250mL锥形瓶、称量瓶、药匙、培养皿、涂布器、EP管、1000uL微量可调仪及配套枪头，将试验用玻璃器皿、配置好的培养基在高压蒸汽灭菌锅内，于121℃灭菌30min。

2.2方法

采集土样1份（采集时去除表层5-8cm后再取样，以免其他杂菌影响实验结果）。称取采集到的土样5克，在超净工作台上放入含有45mL无菌水的锥形瓶（锥形瓶中加入6～8粒玻璃珠）中，进行震荡（5～10min），使土样充分打散。震荡后静置10～20min，取上清液2mL进行离心（转速1000rpm/min，时间1min）。离心后量取上清液0.1mL进行稀释，分别量取稀释率为10-3，1/10-4、1/10-5 和1/10-6的培养液0.1mL接种于培养基中（每一浓度做三组同等对照并做好标记），放入温箱，于30℃培养24h。……