适于标记核酸适配子胶体金的制备及性能
2014-07-24解瑶刘中成张艳芬赵丽健刘利鹏
河北大学学报(自然科学版) 2014年3期
解瑶,刘中成,张艳芬,赵丽健,刘利鹏
(1.河北大学 药学院,河北 保定 071002;2.河北大学 实验室管理办公室,河北 保定 071002)
1990年,Tuerk等首次利用指数富集配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),从人工合成的随机寡核苷酸文库中筛选出与噬菌体T4DNA 聚合酶有高亲和力和特异性结合的寡核苷酸,即核酸适配子[1].适配子功能与单克隆抗体类似,但在诸多方面优于抗体:可化学合成、性质稳定、容易修饰、可以用半抗原小分子作为靶标进行筛选等,在化学、药学等领域受到诸多学者的关注[2].近年来,基于适配子制作传感器,检测靶物质,正成为适配子应用的新热点,其中胶体金标记适配子可制作光学、化学传感器,它具有和免疫胶体金相同的优势,可简单、快速地检测靶物质,且无需专业人员和大型仪器[3-5].
制备胶体金标记抗体主要利用胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子正电荷基团牢固结合,目前对于适于标记抗体的胶体金制备工艺已有很多报道,但有关胶体金标记适配子的研究相对较少[6-7].宋宏新等[8]制备适于标记抗体的胶体金时仅对柠檬酸三钠和抗坏血酸2种还原剂进行了优化,未考虑其他因素的影响,以及各种参数之间的交叉影响.杨玉新等[9]人也只是并列比较4种还原剂制备单分散胶体金颗粒的方法.本实验在前人对适于标记抗体胶体金制备研究基础上,采用了固定变量法,优化了制备适于标记适配子胶体金的条件.因为适配子可通过正电荷与胶……
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