白芷愈伤组织中总香豆素的提取与测定
2014-07-24梁玉玲鲜于梁艳陈子龙
梁玉玲,鲜于梁艳,陈子龙
(1.河北大学 生命科学学院,河北 保定 071002;2.河北省生物工程技术研究中心,河北 保定 071002)
白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.Ex Hoffm.)Benth.et H-ook.f.的干燥根[1].白芷的有效成分主要是挥发油和多种香豆素类成分.香豆素类化合物是一类具有苯骈-α-吡喃酮结构骨架的化合物,其中线性香豆素类化合物为光敏活性物质[2],香豆素类化合物含量的高低是中药白芷品质评价的重要指标之一[3].香豆素类化合物还具有抗菌消炎、镇痛、抗肿瘤[4-6]等功效.目前,白芷药材中有效成分的提取测定工艺已较为完善,但是基本没有以白芷愈伤组织为材料提取香豆素类有效成分的研究.本实验室通过组织培养的方法诱导出大量白芷愈伤组织,而且对白芷愈伤组织中总香豆素的提取及质量分数的测定进行了相关研究,为药用植物白芷的植物生物技术开发和利用奠定了基础.
1 材料与方法
1.1 材料
白芷(A.dahurica)愈伤组织,由本实验室诱导.市售白芷药材购自河北安国药材市场.
1.2 仪器与试剂
KH2200DB型数控超声波清洗器(昆山市禾创超声仪器有限公司);UV/2802SH 型紫外可见分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司);Eppendorf 5804R 型离心机(Eppendorf 公司);欧前胡素标准品(批号MUST-12062105)购自成都曼思特生物科技有限公司,其他试剂均为分析纯.
1.3 方法
1.3.1 标准曲线的绘制
精密称取欧前胡素标准品3.000mg,甲醇溶解定容至100mL即为标准品母液,精密吸取欧前胡素标准品母液1,2,3,4,5,6,7,8,9,10mL,分别用甲醇定容至10mL.以甲醇为空白,于300nm 处测定吸光值,以质量浓度为横……