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诺如病毒衣壳蛋白多克隆抗体的制备及效价分析

2014-02-13赵玉然唐庆娟王静凤王玉明李兆杰薛长湖

食品科学 2014年11期
关键词:检测方法

武 娟,赵玉然,唐庆娟,,王静凤,王玉明,李兆杰,薛 勇,薛长湖

(1.中国海洋大学食品科学与工程学院,食品科学与人类健康实验室,山东 青岛 266003;2.山东省出入境检验检疫局食品与农产品检测机构,山东 青岛 266003)

诺如病毒(Norovirus,NV)是目前最为常见的食源性病毒之一,是一种单链RNA病毒。流行病学调查提示牡蛎等双壳贝类是诺如病毒最主要的食物性传播载体[1]。到目前为止,全世界范围内已报道了数十起食用诺如病毒污染的牡蛎导致的流行性腹泻爆发事件,严重影响了牡蛎的食品安全性[2-7]。近年来,不少国家要求进口的冻贝产品不得携带诺如病毒。我国的贝类产量居世界首位,建立适用于大规模贝类中诺如病毒快速检测的新方法意义重大。

目前,逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)技术是国内检测诺如病毒最主要的手段[8]。但是该技术对仪器设备和检测者的技能均有较高要求,在基层单位很难推广,而且所需时间较长,难以满足贝类产品现场快速检测的要求。另外一种常用方法是酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。国内外研究者利用基因工程方法获得多种基因型的诺如病毒衣壳蛋白或合成肽,联合免疫动物后获得特异性免疫血清,建立了商品化的酶联免疫检测试剂盒[9-11]。由于该方法成本较高,导致试剂盒价格昂贵,不适合在价格相对低廉的贝类产品检测中推广。本实验室在前期工作中利用大肠杆菌系统原核表达了GⅡ-4型诺如病毒衣壳蛋白,表达和纯化的流程相对简单且操作容易,成本较低[12]。……

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